主题:【求助】急事,高手请进

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nihaoxiaole
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我的HPCE电流正常,进样以后DAD检测基线也稳定,但是就是不出峰,我进样进的是标准品啊,怎么回事啊?急死了。
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标准品是槲皮素,检测波长对的,之前用药材做样品进样是出峰的,但是后来做就出不了所以就用标准品试试的。
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标准品是槲皮素,检测波长对的,之前用药材做样品进样是出峰的,但是后来做就出不了所以就用标准品试试的。

药材做的条件和标准品条件是一样的么?标准品是怎么配置的?和缓冲溶液的浓度一样么?
nihaoxiaole
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标准品是槲皮素,检测波长对的,之前用药材做样品进样是出峰的,但是后来做就出不了所以就用标准品试试的。

药材做的条件和标准品条件是一样的么?标准品是怎么配置的?和缓冲溶液的浓度一样么?

条件不一样,标准品在缓冲液中很不稳定,很快就会变掉,所以我把它溶解在无水乙醇中,文献上都记载1或者2毫克每毫升,用时用缓冲液稀释,我1比1稀释后50mbar进样3s,可能浓度太低了,还是怎么的,就是不出峰,进样时间增加就会无电流,急死了。
spfeng
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把样品浓度增加,然后稀释样品的缓冲溶液浓度也增大!
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乙醇能形成的电渗流并不大,应该用和缓冲溶液浓度差不多的溶液来溶解样品,这样就可以避免走一会没有电流的情况了!
cpudaxiao
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原文由 nihaoxiaole 发表:
我的HPCE电流正常,进样以后DAD检测基线也稳定,但是就是不出峰,我进样进的是标准品啊,怎么回事啊?急死了。



可以增大乙醇的稀释倍数(如稀释到5倍或更多),然后增大进样体积(加大压力或延长进样时间)。
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