主题:【第二届网络原创参赛作品】一些处理区带毛细管电泳柱子的方法!

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sunpengwjh
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一些处理区带毛细管电泳柱子的方法


1、开毛细管电泳柱子的检测口
购买来的柱子要上仪器,第一步就是量取好所需长度,开检测口。
先介绍一下开检测口的方法:
(1)用刀片刮去毛细管柱子的表面涂层2mm如图1、2;



(2)用火烧去一部分涂层;将要开检测口的两端用铝薄片包上,留出2mm,放在火焰上烧取表层,看见柱表面变黑,撤走火焰,用酒精棉擦去炭化的表层即可。
(3)用硫酸出去一部分涂层,此法硫酸腐蚀性强,处理起来不方便,不建议用此法!

2、毛细管电泳柱子的前处理方法
分为国内柱子和随国外仪器配备的柱子。
(1)国内柱子处理步骤:
先用1M的盐酸冲洗半个小时左右,然后再用1M的氢氧化钠冲洗30分钟左右,0.1M的氢氧化钠冲洗到基线基本平直为止,之后用水去离子水冲洗柱子,最后用缓冲溶液平衡柱子,这样柱子很好用!


由于毛细管裸管的表面是硅氧键的形式存在,活化的目的一是冲去柱子内的污垢如一些固体附着物等如图3,另外一个更重要的原因是打开硅氧键,生成硅羟基,在缓冲溶液里面硅羟基可以生成双电层如图4,是产生毛细管电泳的驱动力电渗流的原因,其实毛细管电泳仪是电泳和电渗共同作用的结果,从而达到使部分带电性差异物质更好的分离,即引入分离的因素。

(2)国外柱子(购买仪器时所配的柱子)处理步骤:
先用甲醇(色谱纯)冲洗柱子3分钟,主要是去除毛细管柱子中的酯类物质,用去离子水冲洗柱子1分钟,用以去除甲醇,用0.1MNaOH冲洗柱子冲洗30分钟,用来平滑管壁,活化毛细管内壁的硅羟基,去离子水冲洗1分钟,去除NaOH,最后同国产柱子一样用缓冲溶液冲洗柱子。

3、样品之间毛细管柱子的冲洗平衡
(1)进样前先用缓冲溶液清洗,以保持毛细管的清洁及缓冲溶液与毛细管内壁的平衡
(2)在运行10-20个样品之后最好换在以0.1MNaOH冲洗,用水清洗毛细管柱子,用以去除毛细管内壁吸附物质,然后再用缓冲溶液平衡!

4、实验结束后的毛细管柱子的处理:
实验结束后,如果很长时间不使用毛细管柱子应先用水清洗柱子5分钟,然后换上空瓶,吹干毛细管柱子!

5、取出毛细管柱子使用时,如果发现毛细管柱子堵了,可按如下方法处理:
(1)取下堵塞的柱子,先将柱子两端分别截掉2mm左右的长度,然后用仪器的压缩泵吹吹试试,进样端方上缓冲溶液,出口端放一空瓶,看看能不能通,如果不通我们在采用下一个步骤;
(2)仪器本身吹不通,我就可以用钢瓶在试试,刚瓶的压力能大一些;
(3)还可以采用手动泵的方法,将柱子于手动泵连接在一起放在超声里边,如果柱子不是出厂的问题,这个方法最能解决问题
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i_am_ling
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斑竹总结的很全面,讲的也很详细!谢谢斑竹和大家分享
spying
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zhuzhe
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sunpengwjh
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小雨哥
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版主越来越厉害啊!总结的太还好了,受益匪浅呢!谢谢了啊!
sunpengwjh
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原文由 zhchyu 发表:
版主越来越厉害啊!总结的太还好了,受益匪浅呢!谢谢了啊!

好久没有看到楼上这位兄弟了,最近忙什么呢?
double1125
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乘桴浮于海
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spfeng
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很好,总结的很全面。在实际中能用的上!顶一个!!
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