看到这次月旭搞极限色谱柱体验活动,于是就申请了下,因为我们以前也用过他们的柱子,感觉还不错。这次申请色谱柱试用就是想对这款柱子有更深的了解,尽可能的使用这款柱子进行测试和比对,以寻求更好的色谱柱和更有效的处理色谱柱方法。
拿到柱子有几天了,先后测试过5种以上产品,也对这款柱子加深了了解,那么我就这几天测试的结果对比下,初步总结下这款柱子的性能,谈谈感想。
柱子这几天一直做样,做完一种产品后按说明书方法冲柱子,然后做下一产品,平均每天做3种产品,有时候也大批量进样。通过测试不同浓度,使用不同流动相,不同产品的方法得到测试数据以及对测试结果进行比对,来全面的了解、评估这款色谱柱性能,选择更适合这款色谱柱分析的产品,测试如下:
1.色谱柱:
Column Description ultimate XB-C18 5um 4.6X250mm
Catalog Part Number Ult5B18425
Serial Number 210902517
Packing Lot Number 2101.54
2.分析仪器:
岛津20A 紫外检测器 ,安捷伦1200 VWD检测器
色谱柱处理,使用前用100%甲醇对色谱柱进行处理,0.2ml/min 冲洗色谱柱120min 柱温:40度,后改用1.0ml/min 继续冲洗60分钟,柱压5.5MPa,待用。
3.产品检测:
消旋卡多曲的测定(原料药)
流动相: 1.乙腈-醋酸铵缓冲液,有关物质测试
2.乙腈-甲醇-醋酸铵,含量测试
色谱条件:210nm ,1.0ml/min ,以目标峰主成份计理论板数不低低于8000。相邻杂质峰分离度大于1.5.
(选这种原料是因为它对柱效,分离度要求比较高)
测试:有关物质测定,待系统稳定后,柱压7.9MPa。
样品浓度1.0mg/ml 进样3针 塔板数大于9000,一般杂质分析进样浓度比较高,塔板数低,峰型有拖尾,从这款柱子的色谱图来看,塔板数,分离度,分离能力都能达到要求。
主峰钝是由于进样量过大,峰对称性还可以,出峰晚,分离杂质能力强。
于此菲罗门柱同等条件测定的色谱图进行比较,同样也是款新柱子,调用以前做过的图谱。
从色谱图和测试结果来看,同样是两款新柱子,做同一种样品其差异是可见的,对于高浓度进样测试,ultimate色谱柱能很好的保持峰型、柱效和分离度,比较适合这种产品的分析。
再看看低浓度进样,含量测试:(都是选对照)
连续进样5针,
极限色谱柱
菲罗门柱:
从产品要求来说,两款柱子测试的结果都是符合的,从色谱柱性能说是有差异的。
小结:为什么选菲罗门柱,因为我们手头上这款柱子比较多,在一段时间费罗门是我们首选色谱柱,在这里并没有贬低那家的产品,只是拿来做对比罢了。当然,一款色谱柱并不是万能的,可我们的选择是多方面的,找到一款更适合分析产品的条件才是我们要做的。除了这种原料的测试,还做了硝酸异山梨脂,流动相47%的甲醇水,此种产品测试需长时间稳定系统,测试峰型常有拖尾,基线上飘现象,月旭柱测试都有明显改善,图谱就不传了。在后来的两种原料测试中(罗红霉素,甲硝唑),都选择了高浓度进样杂质分析测试,通过这款柱子测定的结果来看,高浓度下峰型保持较好,杂质分离度明显改善,柱效高,出峰时间稍晚些。选择不同产品,不同流动相,不同PH,不同浓度进样,测试结果都较理想。