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主题：【求助】抗菌肽处理的细菌悬浮液上ICP测渗漏的钙离子浓度的样品前处理

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chenwuwarrior

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发表于：2009/12/04 17:34:34 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

各位，本人分离到一株拮抗菌，该菌株能有效地杀灭一些植物病原细菌。根据已有资料，我们推测抗菌肽的作用机制是破坏细菌的细胞膜，进而使细胞内的钙离子、钾离子等释放到胞外。因此，我们计划用ICP测量抗菌肽处理后的细菌悬浮液中钙离子和钾离子浓度的变化。现在苦恼的是不知道如何进行样品的前处理。各位如有良方，请不吝赐教!
十分感谢!

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2009/12/5 11:54:22 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

是不是可以取你的悬浮液来检测就好了～
如果只是检测Ca，K，那么直接消解就好了～～～

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lilongfei14

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2009/12/5 16:28:49 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

用水浸取试试！

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chenwuwarrior

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2009/12/7 19:12:10 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

是不是将有效成份处理过的菌液用细菌过滤器过滤后直接用2%的硝酸硝化就可以了？查了几份文献，关于直接处理液体的资料还真不多见。
用水浸取？麻烦lilongfei14给个详细的说法。
谢谢!

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popo

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2009/12/8 22:08:51 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果你的过滤液是澄清的话我觉得酸化之后就可以做了！～

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chenwuwarrior

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2009/12/13 12:52:28 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 popo(popo) 发表:
如果你的过滤液是澄清的话我觉得酸化之后就可以做了！～

过滤液不是澄清的，但通过0.22um孔径的滤膜后，基本可以认为该溶液中是不含固体溶质的。拮抗菌在液体培养基中发酵培养一段时间后过滤除菌，用无菌滤液(即通过0.22um滤膜处理，外观呈淡黄色)直接处理病原细菌，然后在某些时间点取样检测阳离子浓度的变化。
请问popo，色素的存在是否会干扰测定？
如果存在干扰，那我就只能先把有效成分分离纯化后，溶于PBS(磷酸缓冲液)中再处理病原细菌了。但不知磷酸缓冲液又是否会影响ICP的测定？
呵呵，很业余的问题啊。谢谢各位的帮助!!

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windeast

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2009/12/14 12:02:37 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色素不会干扰测定的。

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popo

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2009/12/14 19:37:35 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 chenwuwarrior(chenwuwarrior) 发表:
原文由 popo(popo) 发表:
如果你的过滤液是澄清的话我觉得酸化之后就可以做了！～

过滤液不是澄清的，但通过0.22um孔径的滤膜后，基本可以认为该溶液中是不含固体溶质的。拮抗菌在液体培养基中发酵培养一段时间后过滤除菌，用无菌滤液(即通过0.22um滤膜处理，外观呈淡黄色)直接处理病原细菌，然后在某些时间点取样检测阳离子浓度的变化。
请问popo，色素的存在是否会干扰测定？
如果存在干扰，那我就只能先把有效成分分离纯化后，溶于PBS(磷酸缓冲液)中再处理病原细菌了。但不知磷酸缓冲液又是否会影响ICP的测定？
呵呵，很业余的问题啊。谢谢各位的帮助!!

那你这个我觉得直接就可以测定。
色素应该不会影响测定。
在ICP测定中，一般不用或者少用磷酸。

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