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主题：【资料】体积排阻色谱

浏览0 回复13 电梯直达
1234chen
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发表于：2009/12/09 15:51:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先一起回顾一下什么是体积排阻色谱。
原理： 以多孔凝胶（如葡萄糖，琼脂糖，硅胶，聚丙烯酰胺等）作固定相，依据样品分子量大小达到分离目的。大分子不进入凝胶孔洞，沿多孔凝胶胶粒间隙流出，先被洗脱；小分子进入大部分凝胶孔洞，在柱中被强滞留，后被洗脱。

根据样品性质分类：凝胶过滤（GFC）—用于分析水溶性样品，如多肽、蛋白、生物酶、寡聚核苷酸、多聚核  苷酸、多糖。
        凝胶渗透（GPC）—用于分析脂溶性样品，如测定高聚物的分子量。
不知各位专家能否讲解一些WELCH MATERIALS 柱子在这方面的应用。给大家一个学习的机会。
该帖子作者被版主 月旭科技--小S加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励来极限色谱柱版发布资料
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2009/12/9 15:52:54 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想分析的是一个分子量在5000左右的样品。
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雪妖
czj_1027
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2009/12/9 22:46:21 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
直接和厂家说清楚你的样品，会有很好的推荐的
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雾非雾
mcds
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2009/12/9 22:49:05 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
月旭也出凝胶色谱柱吗？
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1234chen
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2009/12/10 9:53:31 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
月旭也出凝胶色谱柱吗？  前面查过产品目录好像没找到。不知道有没有。 不过可以给大家介绍点这种柱了的保养，应用。 借鉴学习。
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雪妖
czj_1027
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2009/12/10 19:58:17 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
月旭暂时没有凝胶色谱柱
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1234chen
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2009/12/11 9:56:59 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看来用这种柱子的人不多。目前我们用的GEL柱子是WATERS和TSK的。资料上讲的清洗方法有4种：
1、0.1-0.2mol/L NaOH水溶液（ABA-5PW柱不适用）
测定状态下，用0.1-0.2mol/L的NaOH水溶液通过样品进样阀清洗数次（3-5回）。
2、20-40% 醋酸水溶液
与上述NaOH水溶液的清洗方法相同。
3、在淋洗液中添加水溶性有机溶剂（疏水性吸附物质的去除）
在淋洗液中添加甲醇、乙腈等水溶性有机溶剂（浓度《20%）进行过柱清洗。（注意盐的析出）
4、在淋洗液中添加尿素、中性界面活性剂（难溶性蛋白的去除）
在淋洗液中添加6-8mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性界面活性剂（Triton、Tween、Brij等）后进行过柱清洗。但需注意尿素及界面活性剂的柱中残留。

我常用的是第三种。
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毛毛儿
yangxy12345
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2010/4/26 19:56:58 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有用过这种色谱柱，它对液相本身有什么特别的要求吗？
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东风恶
YJYQXCYS
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2010/4/26 23:09:43 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 毛毛儿(yangxy12345) 发表:
没有用过这种色谱柱，它对液相本身有什么特别的要求吗？

目前还没有特别的要求啊！
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快乐
ynsfeed
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2010/4/30 14:45:04 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这种作为净化的手段比较好。只是价格太贵了。
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毛毛儿
yangxy12345
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2010/4/30 22:19:19 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
这种作为净化的手段比较好。只是价格太贵了。

除了净化以为，也可以用于测试吧！
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