主题：【极限体验活动&原创大赛】四个厂家五种型号色谱柱的对比实验

一、实验目的
比较四个厂家五种型号色谱柱对一样品的分离情况，确定采购订单。
二、色谱柱信息
本实验选用的四个厂家及型号的色谱柱：

图示（未放置安捷伦）（特别亮相）月旭的两根不同型号的3um色谱柱

三、冲洗色谱柱的比较


1、100%有机相冲洗色谱柱情况表

相关色谱图（安捷伦未附图）：

2、5%甲醇冲洗色谱柱情况表



相关色谱图（安捷伦未附图）：

四、同一样品流动相走基线情况表【甲醇:磷酸二氢钾（75:25）】




相关色谱图（安捷伦未附图）：

五、五种不同型号的色谱柱分离样品情况表：【甲醇:磷酸二氢钾（75:25）】




五种不同型号的色谱柱分离样品的色谱图谱：

六、柱子评价
1、本次实验共选了四个厂家，五种型号的色谱柱进行比较，长度不同，填料种类和粒度也不同。由于样品浓度比较低，样品种类单一，所以实验结果并不能全面代表色谱柱的性能，只是作为一个参考而已。样品来源于化学药（左旋氨氯地平），色谱条件为国家药品监督管理局制订的，浓度是作为有关物质检查对照品的浓度。由于样品目前只做了化学药，对于中药的分离效果还尚待比较，以后会继续补上分离中药的色谱图。
2、从实验数据说明，不同色谱柱，同一样品，谱图的差异也较大，峰型差异导致积分方式发生改变，峰面积会稍有不同。同时影响保留时间因素较多，除了极性，还有其他因素，所以主峰的保留时间不同，样品出峰顺序可能会略有改变。
3、由100%有机相冲洗色谱柱的比较数据发现，各色谱柱平衡均较快，基线亦较平，只是在基线平衡之前图谱不同。极限AQ色谱柱出现了原来遇到的一个问题，就是会有峰出现，从谱图上看应该是气泡。（按照月旭工程师的理解，应该是色谱柱头尾处的气泡进入了检测器），气泡消失后，基线平衡。其他的色谱柱没有峰出现，只是在平衡前基线有漂移，漂移大小不一。平衡之后，基线均稳定。从柱压上看，迪马Diamonsil C18 (2)和艾杰尔Promosil C18较接近，压力较小，XB和AQ，因为粒度非常小，所以压力较大，属于正常现象。甲醇和乙腈冲洗统一色谱柱压力相差较大，如AQ色谱柱相差15bar，安捷伦Eclipse XDB C18 压力和迪马、艾杰尔差不多。
4、5%甲醇冲洗色谱柱，不同色谱柱差异较大。压力以安捷伦的最低，为110bar，迪马和艾杰尔相差不大，为130bar左右，3um基线色谱柱达到了170bar上下，平衡后，压力非常稳定。但是AQ在冲洗的过程中发现了一个问题，换到5%的甲醇后，当达到平衡一会，出来比较多色谱峰，而且峰型较大。不知道是不是由于贮存色谱柱的溶剂产生的，还需要官方解答。（流动相没有问题，其他色谱柱正常），其他色谱柱一切正常。
5、采用流动相走基线的时候，不同色谱柱均表现了不同的特点。安捷伦的没有做对比。艾杰尔色谱柱、迪马色谱柱和极限色谱住均出现了较大，较多的峰，以极限XB最多。相似之处是在一组大峰之后，有一个相对较小的色谱峰，保留时间长的色谱峰出峰之后，基线开始恢复平衡，由于不同色谱柱均出现了那个小色谱峰，原因可能在于流动相的问题。XB色谱柱出峰最多，峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚，与其他三根柱子相比，特点更突出。
6、对于样品的测定。由于柱长和填料类型、粒度不一，所以保留时间、分离度相差较大。极限色谱柱由于是3um，150mm长，所以出峰时间最快，为2.9分钟左右，其他色谱柱为250mm，时间再4.2min左右。同时走出来峰型最好的有基线AQ-C18和迪马Diamonsil C18 (2)，对称因子分别为：1.01和0.97。随后是极限XB色谱柱，对称因子为0.8。从以上可以发现，极限色谱柱对样品有较好的峰型，但是由于柱长较短，出峰太快，分离度还尚未达到要求，所以测定此样品含量，选用的是迪马250mm的色谱柱。
对于中药的分离，还需要进一步的比较。总体来说，极限色谱住3um是一个不错的选择，尤其是峰型不好的时候，可以试试。

七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰，这些峰可能来自哪里？
2、采用流动相走基线的时候，极限XB色谱柱出峰最多，峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚？
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少？AQ色谱柱如果不用纯水系统，可否当XB来使用？（如果色谱图没有太大差异）

八、建议
主要建议是在柱子的说明书上。极限色谱柱有说明书、维护手册和报告。每个色谱柱，只有报告不同，其他的都一样。可否附加一份针对该类型的色谱柱的介绍、使用说明，维护等。如AQ系列色谱柱，采用什么填料结构，优点是什么，平时怎样维护，PH使用范围，柱子最大耐受压，性能，禁忌等。
附上迪马的一份针对该类型的柱子说明。