主题：【极限体验活动&原创大赛】四个厂家五种型号色谱柱的对比实验

都是用新柱子做的！真不错啊。
工作量挺大的，
小猪不错，

大师的风范当一览无遗

支持安捷伦的。

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰，这些峰可能来自哪里？
2、采用流动相走基线的时候，极限XB色谱柱出峰最多，峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚？
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少？AQ色谱柱如果不用纯水系统，可否当XB来使用？（如果色谱图没有太大差异）

非常感谢楼主做了如此多的工作来对我们的色谱柱与其它品牌间的比较，也感谢您以中性的语言来评价其它品牌，以避免我们论坛攻击其它品牌的嫌疑，谢谢！


您说3个问题中的前面两个问题我不知道怎么去解释，其实，液相上有很多东西目前仍然是无法解释的。就拿您所做实验的这个例子来说吧，根据您所说的，您冲洗色谱柱的顺序应该是：甲醇（或乙腈）－5％甲醇－流动相。对于第一个问题，众所周知，纯甲醇或纯乙腈的洗脱能力比5％甲醇强，如果说是色谱柱的污染引起了5％甲醇做流动相时的峰那是不合理的，因为如果柱子中有强保留的污染物那么应该早就被纯甲醇或纯乙腈冲洗出来了，又怎么会等到5％甲醇做流动相时才被洗脱出来呢？如果说，这种现象被解是为“用5％甲醇能洗脱出来是因为污染物易溶于水而不溶于纯甲醇，所以用纯甲醇洗脱不下来”，那么我们是用75％甲醇做流动相来测试柱子的，这个时候流动相中是含有25％的水的，要是有溶于水的污染物应该是能洗脱下来的，我想您应该相信我们不会在基线不稳的情况下就进针吧。那么有一个问题是值得一问的，“用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰，这些峰可能来自哪里？”。对不起，我只能说不知道，还请各位高人指点，谢谢啊呵呵。。。


同样，第二个问题我也不知道如何去解释，仪器信息网上卧虎藏龙、高手如云，还盼指点。


第三个问题，在试验中所用的两根XB和AQ色谱柱，其最大耐受压力均为40MPa（是常规液相泵通常能耐压的最高上限）；AQ－C18和XB－C18之间的性能差异不是很大，其主要有两个区别，一.XB－C18（17％）的载碳量比AQ－C18（11％）高，保留时间稍长，分离复杂样品的时候通常分离度较好；第二.XB-C18不适合用于水相比例大于90％时的流动相条件，当水相比例大于90％时有可能造成相塌陷，而AQ－C18则能用于所有比例的流动相条件而不会产生相塌陷。由此可知，AQ色谱柱如果不用纯水系统时完全可以当成XB来使用，有时，特别是对出峰较快的，有一定极性的化合物时甚至有可能具有更好的峰形，您所做的样品谱图就是例子。


此外，在所比较的五根色谱柱中，我个人认为最适合您样品的应该是Ultimate 3um，AQ－C18，4.6×150mm这根柱子。首先一个理由是峰多，峰越多说明对样品的分离能力越强；其次，这根柱子能把主峰后面的那个杂质峰分开，而安捷伦柱和我们的XB柱根据峰形来看好像主峰里面包着一个杂质峰，艾杰尔和迪马柱，峰太少了，说明对该样品的分离能力不太好，您敢确定主峰的里面没有包着杂质峰吗？尤其是在离死体积距离比较近的地方出的峰。

感谢zxhcnf工程师的详细解答！

从峰的数量来看确实极限3um的两根柱子相比其他的峰都要多。而且两根3um柱子分离的峰相比其他色谱柱较相似。其他色谱柱在主峰后面基本上就没有东西再出来，对样品的分离能力肯定比5um的强。主峰的纯度需要通过光谱来确定，稍后补上。如果稍加改变比例，使分离度达到要求，选用AQ柱绝对没有问题。

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰，这些峰可能来自哪里？
2、采用流动相走基线的时候，极限XB色谱柱出峰最多，峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚？
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少？AQ色谱柱如果不用纯水系统，可否当XB来使用？（如果色谱图没有太大差异）

问题1和2的个人观点：极限色谱柱最近我也使用过，刚开始出来很多鬼峰！分析原因，可能是柱子有东西残留！楼主可以先冲上10个柱体积再进样看看，鬼峰应该会消失！要想彻底消除鬼峰，每天进样前最好先用有机相冲洗，如果用5%甲醇冲洗，可能你的色谱图的峰还是相对要多！
XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少？AQ色谱柱如果不用纯水系统，可否当XB来使用？XB和AQ色谱柱应该都是极限色谱柱，你的第三个问题他们应该能解决
问题3个人看法：色谱柱的压力主要跟填料的颗粒大小、柱子的长短、流动相的比例等有关，不同厂家的柱子压力有可能不同！我觉得压力不能代表什么，压力高低不能作为判断柱子好坏的依据！

支持原创,投你一票了.

我支持一下。确实是佳作一篇，受益匪浅！

原文由 xy4585618(xy4585618) 发表:

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰，这些峰可能来自哪里？
2、采用流动相走基线的时候，极限XB色谱柱出峰最多，峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚？
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少？AQ色谱柱如果不用纯水系统，可否当XB来使用？（如果色谱图没有太大差异）

问题1和2的个人观点：极限色谱柱最近我也使用过，刚开始出来很多鬼峰！分析原因，可能是柱子有东西残留！楼主可以先冲上10个柱体积再进样看看，鬼峰应该会消失！要想彻底消除鬼峰，每天进样前最好先用有机相冲洗，如果用5%甲醇冲洗，可能你的色谱图的峰还是相对要多！
XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少？AQ色谱柱如果不用纯水系统，可否当XB来使用？XB和AQ色谱柱应该都是极限色谱柱，你的第三个问题他们应该能解决
问题3个人看法：色谱柱的压力主要跟填料的颗粒大小、柱子的长短、流动相的比例等有关，不同厂家的柱子压力有可能不同！我觉得压力不能代表什么，压力高低不能作为判断柱子好坏的依据！

极限色谱柱的鬼峰是相比其他色谱柱是稍有一些，纯甲醇走后没有鬼峰，接着大比例水冲洗还是会有一点鬼峰出来。不过关系不大，因为鬼峰出后，基线就恢复平稳，不影响分离效果。

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
七、问题
1、用5%甲醇冲洗AQ极限色谱柱出来比较多色谱峰，这些峰可能来自哪里？
2、采用流动相走基线的时候，极限XB色谱柱出峰最多，峰高也是最大的。具体原因还不是很清楚？
3、XB和AQ色谱柱最大耐受压是多少？AQ色谱柱如果不用纯水系统，可否当XB来使用？（如果色谱图没有太大差异）

我这么想的:1、2这两个问题可能是来源于同一个问题，就是关于固定相流失的问题。大部分反相柱是不适合用高水相流动相洗脱的（除了几款特殊的可用纯水做流动相的色谱柱），水相太高，容易把硅胶小球上的键合相溶解，溶解下来的成分被检测器检出；当换成楼主测样的流动相时，流动相的洗脱能力比5%甲醇能力强，把溶解下来的成分进一步洗脱出，造成峰更多更高。因为每个厂家色谱柱的键合相不同，被水溶解的程度也不同，表现在谱图上也就不同。如果要验证是否是固定相流失问题，好像也挺简单，就是色谱柱刚拿到手的时候按标准方法测试一下柱效，待您这个实验做完后再用同一方法条件测一次柱效，如果前后相差较大，则证明是固定相流失的问题。可惜我也是做销售的，苦于没有仪器不能亲自验证。
随想随说，还望指教啊。