主题：【求助】峰型不好怎么分析是仪器的原因还是柱子的原因啊

原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
楼主用流动相是什么，前面会有哪么大的一个倒峰？

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楼主用流动相是什么，前面会有哪么大的一个倒峰？

原文由 xue2009(xue2009) 发表:
最有可能是两个原因；1是柱子脏了，使得峰型难看，如果是的话就把柱子冲下，这个可能性最大；2就是标准品是不是有问题，重新配置标准品就清楚了。

原文由 ruby70303(ruby70303) 发表:

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原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
我认为仪器上的可能性不大，有可能是水、乙腈或蛋白质累积造成的。

第一.您这几个谱图由好变化的时间间隔多久不太清楚，因为要考虑是否是污染引起的累积效应，如果知道变化的时间会比较好判断；

第二.这个问题可能跟您用的水、乙腈有关，请确认一下最近是否换过跟以前不同的水或乙腈品牌，之前我有一个做三聚氰胺的朋友用我们的柱子做样，发现在主峰后面总有一个比主峰更大的峰，后来查明是乙腈的原因；

第三.您做三聚氰胺的前处理方法是否是用国标方法，这没说明白，因为如果不是国标方法，有可能蛋白没有除干净，需要冲洗蛋白。蛋白累积到一定程度的时候是有可能造成这样的影响的，除蛋白的方法：乙腈：水：三氟乙酸＝50：50：0.1以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min，如果不是Welch公司的色谱柱，请不要反向冲洗。通常反向冲洗的效果会比较好，但正向冲洗也能起作用。

个人觉得样品前处理的问题，本来三聚氰胺就是为了提高蛋白的，所以，样品本身含的蛋白也高，前处理很难全部除净，这样，检测时间长了，色谱柱就会有吸附，这样就会造成影响。

快乐有没有什么好的建议改善这种情况呀？呵呵，学习一下。

原文由 xue2009(xue2009) 发表:
最有可能是两个原因；1是柱子脏了，使得峰型难看，如果是的话就把柱子冲下，这个可能性最大；2就是标准品是不是有问题，重新配置标准品就清楚了。

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原文由 xue2009(xue2009) 发表:
最有可能是两个原因；1是柱子脏了，使得峰型难看，如果是的话就把柱子冲下，这个可能性最大；2就是标准品是不是有问题，重新配置标准品就清楚了。

据我做三聚氰胺的经验，大多数是前者，柱子脏了。

原文由 1234chen(1234chen) 发表:

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:

原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:
呵呵！终于有专家给出全面的解答了，不知楼主还有信息需要补充么?您的问题是否得到解决？

多谢小S版主的抬爱，在这里我要纠正一下。
我不认为自己是什么专家，液相是一个很深的东西，内容保罗万象，就算做了几十年的液相也还会有很多不了解的东西，需要不断的学习，不是什么人都可以随随便便挂上“专家”的名号，我也不例外，更何况在卧龙藏虎的仪器信息网上呢。我认为自己只是对Welch公司的产品了解多一点，做的样品多一点而已，没有别的，但是我愿意将我的经验跟大家一起分享，用我的真诚和热情尽我最大的努力来为朋友们分忧解难，如果能为大家提供一点有益的帮助，那将是我最大的欣慰。如未能如愿解决您的问题，也请您原谅，因为我的能力是有限的，谢谢啊呵呵。。。

zxhcnf一贯比较低调，值得赞赏。
漂移的原因可能有很多，流动相的偏差，温度、仪器、柱子。

原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
三聚氰胺干扰很严重，所以一定要加基质来检测，消除基质效应，定量会更加准确。

加基质还有一个好处，能让你知道调流动相，把基质的干扰与三聚氰胺的峰分开。

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原文由 xue2009(xue2009) 发表:
最有可能是两个原因；1是柱子脏了，使得峰型难看，如果是的话就把柱子冲下，这个可能性最大；2就是标准品是不是有问题，重新配置标准品就清楚了。

据我做三聚氰胺的经验，大多数是前者，柱子脏了。