我们用的方法摘要如下:
2,4-D含量的测定(HPLC法)
1 方法提要
试样用甲醇溶解,以甲醇+水(用磷酸溶液将水pH值调至2.6)为流动相,使用以C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器(225nm),对试样中的2,4-D进行反相高效
液相色谱分离,内标(对澳苯酚)法定量。
2 试剂和溶液
甲醇
磷酸
磷酸水溶液:磷酸的体积分数为10%
水:新蒸二次燕馏水。
流动相 : 甲醇+水=65+35(体积比),其中水用磷酸水溶液调pH值至2.6 。流动相经滤膜过滤,并在超声波浴槽中脱气20 min,
2, 4-滴标样:已知含量,大于等于99.0%.
内标物 :对澳苯酚,不含干扰分析的杂质。
内标溶液 :称取6.8g 对澳苯酚于1L容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。
3 仪器、设备
高效
液相色谱仪:岛津LC-20A 具有可变波长紫外检测器。
色谱柱:250mmX4.6mm(id)不锈钢柱,内装pBondapakC18填充物,粒径5微米。
过滤器 :滤膜孔径约为0.5微米
4 高效
液相色谱操作条件
流动相:甲醇+水=65十35(体积比),其中水用磷酸水溶液调pH值至2.6,
流动相: 1.0 mL/min,
柱温 :室温。
检测波长 :225nm,
进样体积:5微升,
保留时间:2,4-滴约7.2min;对澳苯酚约5.8 min,
5 测定步骤
a) 标样溶液的配制
称取2, 4-滴标样0.05 g (准确至0.0002 g ),置于25m1容量瓶中,用移液管加人5mL内标溶液,加甲醇稀释至刻度,摇匀。取该溶液1mL于10mL容量瓶中用甲醉稀释至刻度,摇匀。
b) 试样溶液的配制
称取含2 ,4-滴0.05g(精确至0.0002g)的试样.置于25mL容量瓶中,用与a)同一支移液管加人5mL内标溶液,加甲醇稀释至刻度,摇匀。取该溶液1mL于10mL容量瓶中用甲醉稀释至刻度,摇匀。
c) 测定
在上述操作条件下,待仪器基线稳定后,连续注人数针标样溶液,直至相邻两针的2,4一滴峰面积与对溴苯酚峰面积比变化小于1.0%时,按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。