主题:【讨论】极限色谱柱中哪一款是适合检测氨基酸的

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zxhcnf
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“快乐”朋友,对不起,由于回老家过的年,走得比较早,没能及时的看到您要分析氨基酸方法的留言,请见谅!今天发给您。
zxhcnf
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原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
看到有人提到,检测氨基酸时,可以用“PITC柱前衍生,水性C18柱”,请专家解释一下。

PITC 柱前衍生法,通常走的是梯度,走梯度是没有必要用水性柱的,因为它的梯度设定中有机相比例的会随着时间的延长变大,也就是说,分析过程中不是持久的纯水相条件,至少有较长的一段时间流动相中有机的比例大于10%,这种情况下是没有必要用水性C18柱的。
这里我解释一下,什么情况下才需要用水性C18柱(我们公司对映的是AQ-C18),由于常规的C18柱(如我们的XB-C18)在水相比例大于90%的条件下容易产生相塌陷(就是保留时间越来越短的现象,注意区别柱头塌陷),为克服这个缺陷,使得水相和有机相的所有比例范围内都能使用,因而开发了水性柱。也就是说只有长时间(>2小时)的用水相大于90%或95%的流动相作流动相时,相塌陷才会产生,短时间内是不会的。所以,“PITC柱前衍生,水性C18柱”这个说法本身没有错,因为它确实也可以用水性柱来做,可能他们做实验的结果表明用水性C18更合适,因此推荐用他们的水性C18。但是,要是说“必须用水性C18”来做这是不对的。
雪妖
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有了方法,那做的时候也要很小心,试用了再写了原创,很好哦
liudi20052006
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C18衍生,PITC或2,4-二硝基氟苯衍生试剂衍生
AQ-C18
氨基柱
三种都可以的
雪妖
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原文由 liudi20052006(liudi20052006) 发表:
C18衍生,PITC或2,4-二硝基氟苯衍生试剂衍生
AQ-C18
氨基柱
三种都可以的


有具体的操作方法吗?贴上来,大家分享一下呀
wanglinglan
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青林
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头像更新中,请稍候…
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原文由 青林(wyqql2060) 发表:
我们也是买了WATERS的柱子做氨基酸。很贵!!

不常见的柱子,一般都比较贵~
我指,相对不常见~
zcp915
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原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
我用的是WATERS UPLC ,它们公司的分析包太贵了,不想买分析包。我想用柱前衍生,前处理方法我基本了解了,但想找一根适合的柱子来做,请极限色普柱的专家给点建议。

Waters 的UPLC 通常用的色谱柱填料粒径是1.7um的短柱子,由于色谱柱短,所以分析速度快,但压力也很高。
Waters的方法包针对的是一个特定的体系,也就是说是专门针对这款柱子开发的方法,将方法包转移到其它色谱柱上是需要调整的。
事实上很多C18的柱子都可以用于氨基酸的分析,而且也有很多方法可以供选择,比如用异硫氰酸苯酯来做衍生化试剂。您不想购买他们的方法包,可以试用一下我们的Ultimate XB-C18,5um,4.6×250mm的柱子,分析方法如下:


能不能麻烦您把Ultimate XB-C18,5um,4.6×250mm的柱子的具体方法和信息发给我一下,我最近也要用:zcp915@126.com
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