原文由 阿三(junqiwudi) 发表:原文由 环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:理论还是不扯淡的,只是要辩证的看原文由 阿三(junqiwudi) 发表:原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:开始流速不用管,只要进针前能有段时间是正常流速就行,俺是这么理解滴原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
流速1.0ml/min,我们通常都是0.8ml/min来平衡色谱柱的。
能不能再降低一点,先用0.5ml/min的流速,在分析前再按照正常分析条件运行一次,是否可以
完全正确,合情合理
别信什么扯淡的理论
原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
平衡柱子所用流速的快慢并无定论,但不管之前的流速是怎么样的,进针的那一刻必须保证体系稳定,基线平稳。也就是说首先要确保不影响分析,同时有能够节约时间。因此,我认为只要柱压不是很高,系统能够耐受的条件下,最初平衡的时候流速可以快一点,有利于色谱柱和管路系统尽快的充满流动相并在该流速下均匀一致,但进样前一定要用方法规定的流速来平衡一下色谱柱,因为流速大小对基线是有影响的。举个例子说一下吧,我们最常使用的色谱柱是4.6×150或250mm的,1.0ml/min是它的常用流速。如果要用的是21.2×150或250mm的制备柱,方法流速要求是5ml/min,根据线流速一致的原则,它的21.2ml/min流速就相当于4.6×150或250mm的1.0ml/min,假如这个时候我们就用方法上的流速5ml/min来平衡色谱柱(相当于4.6内径的0.25ml/min),要多长时间才能平衡啊,按惯常的4.6*150mm 1.0ml/min平衡30min来算21.2×150mm在5ml/min需要120min,多浪费时间啊,这个时候应该可以先用20ml/min的流速跑30min,然后再把流速降下来走个10min左右稍微稳定一下系统就可以了。所以,具体的情况还需具体分析,只要能实现平衡柱子的目的,而且没有额外损失,中间过程可以灵活控制,但通常建议用方法确定的流速来平衡柱子比较好,毕竟所举例子上的情况不多。