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主题：【已应助】【求助】请教：流动相复溶问题！

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lwjxzj
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发表于：2010/03/03 15:01:37 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个血浆的样品分析方法学
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2010/3/3 16:42:55 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一、这个正常，复溶后再离心取上清就行
二、别完全挥干（挥至尽干），加流动相定容看看会不会出现悬浮物。
三、液相能看得到，含量还可以，加大复溶体积，用微型过滤器过器（有一种专门过小量样品的过滤器，液体损失很少），前提是对目标物无吸附
该帖子作者被版主 capinter加 4积分， 2经验，加分理由：应助
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2010/3/3 16:47:12 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得用针筒过滤好麻烦
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2010/3/3 17:02:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原来这样，最简单、省钱就离心取上清
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2010/3/3 19:54:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问你可以说说这种微型过滤器具体的品牌么？没有用过。。。
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bhnchnuo
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2010/3/3 22:24:19 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个，还真不太清楚？
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muziying114
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2010/3/4 8:22:41 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lwjxzj(lwjxzj) 发表:
请问你可以说说这种微型过滤器具体的品牌么？没有用过。。。
再则就是，用普通的那种小注射器前面加个滤膜的好使么？我感觉复溶体积太小，过滤。。。。。。加大复溶体积又会影响检测限

我是离心取的上清，
我的办法是，蛋白沉淀之后，离心取上清，然后尝试过两种取的办法，一个是将上清倒出来。。。另外一个是将上清用一次性枪头吸出来。。。感觉结果都差不多。。。。因为为了提高回收率，还是尽量要把上清液都转移过来吧。。。

另外我觉得不是药物的问题，我单独操作血浆，不加药，也有类似的情况，这个中间是不是有什么诀窍？关于蛋白沉淀的。。。


以前用过，进口的，没注意是什么牌子！作用同普通的过滤器一样，只是横切面小，液体损失少，接普通的注射器。能离心就离心吧，过滤的成本比较高，以前我们是用于量少，且需要无菌的药理方面。
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lwjxzj
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2010/3/4 11:45:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可是离心之后还是有漂浮的。
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2010/3/4 14:00:28 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没人了解的嘛？？
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hyfwkd
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2010/3/4 18:25:24 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
建议这种情况用液液萃取试试，相对来说要比直接沉淀蛋白要干净的多，而且也没固相萃取那么麻烦
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2010/3/5 5:01:32 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1，要用初始流动相，不要用纯有机相。复溶时可以超声试试。

2，离心不能解决就要用过滤头
 
  Waters Syringe Filters， P/N WAT200508, 4mm PTFE 0.45um (好用，溶液残留非常少，低于10uL）

  Phenomenex regenerated cellulose membrane 0.45um, 4mm syringe filters, P/N AF0-3103-52.

  国产的也有，但是牌子忘了，上海的试剂公司就有。


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