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液相色谱（LC）

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主题：【求助】请问各位我这样的洗脱程序对柱子的损害大么？

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chenlover1208

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发表于：2010/03/12 09:40:34 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请问各位：我用的是反相色谱，C18的柱子，流动相：A相（1%乙酸） B相（纯乙腈），梯度洗脱程序初始比例为A相100% 运行10分钟。再加上之前跑基线平衡大约30分钟也都是用初始梯度。柱子在100% A相的条件下至少运行40分钟。看过资料里说一般不要用低于5%的有机相冲洗柱子过久，否则会引起C18链的卷曲，对柱子造成损害。不知道我天天这样运行对柱子的损害大不大？有什么好的方法调节么？

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2010/3/12 9:45:51 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你的这个方法是标准上的方法吗？可以去买一根亲水性的色谱柱，一般的C18柱不耐纯水相。

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chenlover1208

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2010/3/12 15:46:35 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不是国标的方法。用国标无法完全洗脱。这个是我调整后的，各组分的分离情况不错。因为时间关系现在不能换柱子，有没什么别的好方法？

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serlina

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2010/3/12 15:48:55 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我根柱子半年就不行了

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s123sun

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2010/3/12 15:56:11 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

C18的柱子不一定用有机流动相，只是不能用纯水相，我用过缓冲盐流动相，也能检测2000-3000个样品

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chenlover1208

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2010/3/12 16:02:13 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 chenlover1208(chenlover1208) 发表:
请问各位：我用的是反相色谱，C18的柱子，流动相：A相（1%乙酸） B相（纯乙腈），梯度洗脱程序初始比例为A相100% 运行10分钟。再加上之前跑基线平衡大约30分钟也都是用初始梯度。柱子在100% A相的条件下至少运行40分钟。看过资料里说一般不要用低于5%的有机相冲洗柱子过久，否则会引起C18链的卷曲，对柱子造成损害。不知道我天天这样运行对柱子的损害大不大？有什么好的方法调节么？

抱歉，各位，前面的这个描述不太准确。
我的洗脱方法是： 0至10分钟，由100%的A相（即1%乙酸）变为90%A：10%B（纯乙腈）。平衡的时候用的依然是100%A(1%乙酸)平衡30min。

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