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主题：【求助】做标准曲线出现的问题，急急急！！！

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liuzhikun
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发表于：2010/05/29 23:40:29 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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我在做实验时的一些资料是科研老师给的，我是测土壤碱性磷酸酶的，用磷酸苯二钠测的，在做标准曲线时，加的缓冲液的量跟测样品时加的缓冲液的量不一样，而且差的挺多的（曲线加5毫升，样品加0.25毫升），这对实验有影响吗？而且我做的曲线，显色不是很明显，我感觉就是加缓冲液的量太大了。

有谁可以帮帮我，非常谢谢！
推荐答案：ylchd_bj回复于2010/06/01
酸度对显色的速度和强度影响较大，缓冲溶液实际上是控制显色体系酸度的稳定性，因此做一下缓冲溶液的用量试验，比如在其他条件不变的情况下，改变缓冲溶液的加入量；另外，关注一下显色温度。从你的结果分析，缓冲溶液的量应该加一致，否则试液和标准溶液的摩尔吸光系数不一致，结果也测不准确；从经验看，试液显色缓冲溶液加入量不够。
补充答案：

coffee8回复于2010/06/01

曲线和样品加入的缓冲溶液不一样，那标准溶液和样品溶液的酸度是否一致呢？

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2010/6/1 15:50:27 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
酸度对显色的速度和强度影响较大，缓冲溶液实际上是控制显色体系酸度的稳定性，因此做一下缓冲溶液的用量试验，比如在其他条件不变的情况下，改变缓冲溶液的加入量；另外，关注一下显色温度。从你的结果分析，缓冲溶液的量应该加一致，否则试液和标准溶液的摩尔吸光系数不一致，结果也测不准确；从经验看，试液显色缓冲溶液加入量不够。
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2010/6/1 22:04:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
曲线和样品加入的缓冲溶液不一样，那标准溶液和样品溶液的酸度是否一致呢？
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2010/6/1 22:26:56 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 coffee8(coffee8) 发表:曲线和样品加入的缓冲溶液不一样，那标准溶液和样品溶液的酸度是否一致呢？
  我也不知道阿。我是用磷酸苯二钠测定碱性磷酸酶的活性，我都不是很清楚啊…反正我刚确认，曲线和样品加入的缓冲液不一样，前面硼酸缓冲液，后面是氯化铵—氢氧化铵缓冲液啊。样品滤液少吸取，是不是后面加的显色剂要等比例所以啊？
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2010/6/1 22:30:22 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢啊…我想再问下啊，土壤培养时间长短，对土壤酶含量测定影响大吗？
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