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液相色谱（LC）

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主题：【求助】基线漂移问题

浏览0 回复7 电梯直达

dagoubin

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发表于：2010/06/14 17:50:19 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

大家知道流动相中加入三乙胺可以起到改善峰型的作用，请教大家一下，在做梯度洗脱时，流动相中加入三乙胺会导致基线漂移吗，用乙酸铵代替三乙胺会有什么区别吗？

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2010/6/14 21:58:23 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

三乙胺主要是做为扫尾剂，在分析碱性化合物时用的，防止于色谱柱上的硅醇基结合导致拖尾。我配的流动相三乙胺添加后，峰开始会有点漂的，保留时间不稳。所以要平衡时间长一点，多走几针就好了

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有水有渝

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2010/6/15 8:21:09 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

检测波长是多少，梯度变化过程是什么样的？

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dagoubin

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2010/6/17 22:36:16 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
检测波长是多少，梯度变化过程是什么样的？

检测波长263nm，梯度变化是0~25分钟，乙腈由5%变到25%，pH3.5的三乙胺缓冲液由95%到75%，然后保持5分钟，30~35分钟是乙腈由25%回变到5%。我一共要分离4种物质

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有水有渝

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2010/6/17 22:42:53 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有梯度变化基线多少都会有点漂移，但在263nm下应该漂移不是很大，不知道你的漂移有多少。乙酸铵代替三乙胺的效果还真没有度过，但在相同摩尔浓度下，三乙胺的碱性比乙酸铵强，有时间你可以去试一下。

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dagoubin

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2010/6/27 21:54:40 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
有梯度变化基线多少都会有点漂移，但在263nm下应该漂移不是很大，不知道你的漂移有多少。乙酸铵代替三乙胺的效果还真没有度过，但在相同摩尔浓度下，三乙胺的碱性比乙酸铵强，有时间你可以去试一下。

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2010/6/27 21:56:37 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 dagoubin(dagoubin) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
有梯度变化基线多少都会有点漂移，但在263nm下应该漂移不是很大，不知道你的漂移有多少。乙酸铵代替三乙胺的效果还真没有度过，但在相同摩尔浓度下，三乙胺的碱性比乙酸铵强，有时间你可以去试一下。

我换了乙酸铵试了，呵呵，效果很好，基线一点都不漂，但我一直不明白为什么会这样

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xue2009

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2010/6/28 10:22:39 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 dagoubin(dagoubin) 发表:
原文由 dagoubin(dagoubin) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
有梯度变化基线多少都会有点漂移，但在263nm下应该漂移不是很大，不知道你的漂移有多少。乙酸铵代替三乙胺的效果还真没有度过，但在相同摩尔浓度下，三乙胺的碱性比乙酸铵强，有时间你可以去试一下。

我换了乙酸铵试了，呵呵，效果很好，基线一点都不漂，但我一直不明白为什么会这样

这个可能跟三乙胺可以和硅羟基发生强烈的作用有关，使得硅羟基占据了较多的结合位点，因而是样品与固定相的作用减弱，基线也差。

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