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硅胶表面密布硅醇基,所谓键合和封尾都是有机硅烷试剂与硅醇基的反应。仅通过C18链等固定相键合,由于空间位阻效应,只有20-40%左右的硅醇基参与反应。封尾试剂一般为C1小分子,能与未和固定相碳链反应的残余硅醇基进一步反应。封尾的目的是为了屏蔽残余硅醇基易造成色谱峰拖尾的反应活性。
载碳量是衡量硅胶表面键合及封尾程度的一个重要指标,固定相和封尾小分子都含碳,而硅胶颗粒原先是不含碳的。载碳量越大,说明键合封尾程度越高,硅胶表面疏水性也越强,极性越弱。
实际色谱柱选择时如何考虑这个问题呢?或者说是否关注这个指数。
在选择色谱柱之前,如果已知待测化合物的极性较强,那么在载碳量较高的C18色谱柱上保留都会很短,导致分不开。这时就要考虑用载碳量小的或者不封尾的C18柱。
月旭公司有几款针对极性较强化合物分离用的色谱柱,对极性化合物的保留由弱到强分别是:
AQ-C18, XB-CN, LP-C18
他们的载碳量分别是12%,7%,10%(不封尾)
AQ和LP有什么区别?
AQ-C18和 LP-C18的相同点是,都可在纯水相的条件下使用;不同点是,1)AQ的是封尾的,LP没有封尾;2)pH范围不同,AQ是1.5~10,LP是耐酸性的柱子pH为1~8,特别适合在酸性条件下使用;