主题：【求助】色谱柱封尾问题

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:

原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:
看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章，里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题，这个在怎么理解，能详细解释一下吗？有哪些注意事项呢？
原文如下：

中药成份的化合物通常分子量不会太大，120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径，因为分析大分子的机会并不是很多，这个时候60A、80A、100A、120A对分离都不会有太大的影响，倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些，因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A、100A、120A这种。现在做多肽的越来越多，考虑到多肽通常分子量比较大的原因，他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。



http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml

载炭量的大小意味着色谱柱上键合C18的多少，载炭量越大，固定相表面的疏水性就越强，与非极性化合物间的作用力就越大，因此载炭量越大非极性化合物在色谱柱上的保留能力就越强，相同条件下，载炭量越大的色谱柱非极性化合物峰出来得越晚，在分离成分复杂样品的很多时候分离效果会好一些。封尾和不封尾对色谱行为的影响，通常硅羟基容易引起对极性化合物和碱性化合物的拖尾，因此，对带有－NHR、－NR2和NH2等容易被硅羟基影响的化合物的分析，为保持良好的峰形最好选择封尾良好的色谱柱，封尾越彻底，化合物接触硅羟基的机会就越小，拖尾就越不容易发生。而对于有些化合物极性稍大一点，在良好封尾的色谱柱上保留能力不足，需要更多一点保留时，硅羟基的极性也许是一个良好的作用位点，比封尾的色谱柱能获得更好的保留；此外，封尾试剂通常是用小分子的硅烷，这种小分子硅烷在强酸性条件下（pH<2）时因Si－C键的断裂而容易流失，造成原有色谱性能的改变和基线的不平稳，而不封尾的填料则没有这个影响，因为Si－O在强酸性（除HF外）条件下稳定性依然很好，所以在强酸性条件下分析时，为避免色谱柱很快就坏掉，最好选择没有封尾的色谱柱，我们的LP－C18就是没有封尾的，能耐到pH 1的强酸性条件。

原文由 快乐(ynsfeed) 发表:

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:

原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:
看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章，里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题，这个在怎么理解，能详细解释一下吗？有哪些注意事项呢？
原文如下：

中药成份的化合物通常分子量不会太大，120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径，因为分析大分子的机会并不是很多，这个时候60A、80A、100A、120A对分离都不会有太大的影响，倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些，因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A、100A、120A这种。现在做多肽的越来越多，考虑到多肽通常分子量比较大的原因，他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。



http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml

载炭量的大小意味着色谱柱上键合C18的多少，载炭量越大，固定相表面的疏水性就越强，与非极性化合物间的作用力就越大，因此载炭量越大非极性化合物在色谱柱上的保留能力就越强，相同条件下，载炭量越大的色谱柱非极性化合物峰出来得越晚，在分离成分复杂样品的很多时候分离效果会好一些。封尾和不封尾对色谱行为的影响，通常硅羟基容易引起对极性化合物和碱性化合物的拖尾，因此，对带有－NHR、－NR2和NH2等容易被硅羟基影响的化合物的分析，为保持良好的峰形最好选择封尾良好的色谱柱，封尾越彻底，化合物接触硅羟基的机会就越小，拖尾就越不容易发生。而对于有些化合物极性稍大一点，在良好封尾的色谱柱上保留能力不足，需要更多一点保留时，硅羟基的极性也许是一个良好的作用位点，比封尾的色谱柱能获得更好的保留；此外，封尾试剂通常是用小分子的硅烷，这种小分子硅烷在强酸性条件下（pH<2）时因Si－C键的断裂而容易流失，造成原有色谱性能的改变和基线的不平稳，而不封尾的填料则没有这个影响，因为Si－O在强酸性（除HF外）条件下稳定性依然很好，所以在强酸性条件下分析时，为避免色谱柱很快就坏掉，最好选择没有封尾的色谱柱，我们的LP－C18就是没有封尾的，能耐到pH 1的强酸性条件。

专业性很强，这个若能完全理解，对自己提高就大了。

原文由 swallow_zhyan(swallow_zhyan) 发表:

原文由 快乐(ynsfeed) 发表:

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:

原文由 huaibeijiayuan(huaibeijiayuan) 发表:
看了卢工讨论色谱柱粒径问题的文章，里面z版主讲到柱封尾、碳载量问题，这个在怎么理解，能详细解释一下吗？有哪些注意事项呢？
原文如下：

中药成份的化合物通常分子量不会太大，120A孔径的柱子应该足够了。我们选柱子的时候很少问孔径，因为分析大分子的机会并不是很多，这个时候60A、80A、100A、120A对分离都不会有太大的影响，倒是色谱柱封尾不封尾、载碳量大不大这些考虑得更多一些，因此没有特殊说明通常我们都会默认为是、80A、100A、120A这种。现在做多肽的越来越多，考虑到多肽通常分子量比较大的原因，他们选柱子的时候通常首先就考虑孔径的问题。



http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100609/2601563/index_2.shtml

载炭量的大小意味着色谱柱上键合C18的多少，载炭量越大，固定相表面的疏水性就越强，与非极性化合物间的作用力就越大，因此载炭量越大非极性化合物在色谱柱上的保留能力就越强，相同条件下，载炭量越大的色谱柱非极性化合物峰出来得越晚，在分离成分复杂样品的很多时候分离效果会好一些。封尾和不封尾对色谱行为的影响，通常硅羟基容易引起对极性化合物和碱性化合物的拖尾，因此，对带有－NHR、－NR2和NH2等容易被硅羟基影响的化合物的分析，为保持良好的峰形最好选择封尾良好的色谱柱，封尾越彻底，化合物接触硅羟基的机会就越小，拖尾就越不容易发生。而对于有些化合物极性稍大一点，在良好封尾的色谱柱上保留能力不足，需要更多一点保留时，硅羟基的极性也许是一个良好的作用位点，比封尾的色谱柱能获得更好的保留；此外，封尾试剂通常是用小分子的硅烷，这种小分子硅烷在强酸性条件下（pH<2）时因Si－C键的断裂而容易流失，造成原有色谱性能的改变和基线的不平稳，而不封尾的填料则没有这个影响，因为Si－O在强酸性（除HF外）条件下稳定性依然很好，所以在强酸性条件下分析时，为避免色谱柱很快就坏掉，最好选择没有封尾的色谱柱，我们的LP－C18就是没有封尾的，能耐到pH 1的强酸性条件。

专业性很强，这个若能完全理解，对自己提高就大了。

载碳量大小，封尾与否，决定了各种色谱柱的选择性差异，重要的就是根据样品的特点选对合适的柱子，有问题找版主，明白啦，哈哈

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
载炭量的大小意味着色谱柱上键合C18的多少，载炭量越大，固定相表面的疏水性就越强，与非极性化合物间的作用力就越大，因此载炭量越大非极性化合物在色谱柱上的保留能力就越强，相同条件下，载炭量越大的色谱柱非极性化合物峰出来得越晚，在分离成分复杂样品的很多时候分离效果会好一些。封尾和不封尾对色谱行为的影响，通常硅羟基容易引起对极性化合物和碱性化合物的拖尾，因此，对带有－NHR、－NR2和NH2等容易被硅羟基影响的化合物的分析，为保持良好的峰形最好选择封尾良好的色谱柱，封尾越彻底，化合物接触硅羟基的机会就越小，拖尾就越不容易发生。而对于有些化合物极性稍大一点，在良好封尾的色谱柱上保留能力不足，需要更多一点保留时，硅羟基的极性也许是一个良好的作用位点，比封尾的色谱柱能获得更好的保留；此外，封尾试剂通常是用小分子的硅烷，这种小分子硅烷在强酸性条件下（pH<2）时因Si－C键的断裂而容易流失，造成原有色谱性能的改变和基线的不平稳，而不封尾的填料则没有这个影响，因为Si－O在强酸性（除HF外）条件下稳定性依然很好，所以在强酸性条件下分析时，为避免色谱柱很快就坏掉，最好选择没有封尾的色谱柱，我们的LP－C18就是没有封尾的，能耐到pH 1的强酸性条件。

原文由 liuliuhui(liuliuhui) 发表:
其实说起来容易，但真正想要选对柱子不是很容易的。

原文由 幽灵龙猫(xiaodu2007693) 发表:

原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
载炭量的大小意味着色谱柱上键合C18的多少，载炭量越大，固定相表面的疏水性就越强，与非极性化合物间的作用力就越大，因此载炭量越大非极性化合物在色谱柱上的保留能力就越强，相同条件下，载炭量越大的色谱柱非极性化合物峰出来得越晚，在分离成分复杂样品的很多时候分离效果会好一些。封尾和不封尾对色谱行为的影响，通常硅羟基容易引起对极性化合物和碱性化合物的拖尾，因此，对带有－NHR、－NR2和NH2等容易被硅羟基影响的化合物的分析，为保持良好的峰形最好选择封尾良好的色谱柱，封尾越彻底，化合物接触硅羟基的机会就越小，拖尾就越不容易发生。而对于有些化合物极性稍大一点，在良好封尾的色谱柱上保留能力不足，需要更多一点保留时，硅羟基的极性也许是一个良好的作用位点，比封尾的色谱柱能获得更好的保留；此外，封尾试剂通常是用小分子的硅烷，这种小分子硅烷在强酸性条件下（pH<2）时因Si－C键的断裂而容易流失，造成原有色谱性能的改变和基线的不平稳，而不封尾的填料则没有这个影响，因为Si－O在强酸性（除HF外）条件下稳定性依然很好，所以在强酸性条件下分析时，为避免色谱柱很快就坏掉，最好选择没有封尾的色谱柱，我们的LP－C18就是没有封尾的，能耐到pH 1的强酸性条件。

谢谢zxhcnf版主 每次回答都这么详细

原文由 swallow_zhyan(swallow_zhyan) 发表:
载碳量大小，封尾与否，决定了各种色谱柱的选择性差异，重要的就是根据样品的特点选对合适的柱子，有问题找版主，明白啦，哈哈