主题:【分享】LC2010A操作规程

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岛津LC-2010AHPLC操作规程.doc

1、目的  规范岛津LC-2010A型高效液相色谱仪的使用。
2
、范围  适用于岛津LC-2010A型高效液相色谱仪的使用。
3
、规程
3.1
系统组成
本系统由容器箱、 自动进样器、检测部、输液部、柱温箱、系统控制器、Easy3000工作站和电脑等组成。
3.2
准备
3.2.1 准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气至少20min
3.2.2
根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)。
3.2.3
配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用0.45μm滤膜过滤。
3.2.4
检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
3.3
开机
接通电源,按下系统控制器面板上的电源开关        上托画面上显示要输入Login Pass-ID-No的对话框,输入00000后,按      [OK]        显示Menu画面,         
选择Method画面,在Method画面进行相关参数设定,然后打开电脑显示器、主机,最后打开色谱工作站。
 
3.4
参数设定
3.4.1 波长设定 Method画面上,将光标置于UV-VIS检测器波长设定的栏内,用数字键输入所需波长值,按[Enter]键确认。
3.4.2
流速设定 Method画面上,将光标置于流量设定的栏内,用数字键输入所需的流量(柱在线时流量一般不超过1ml/min),按[Enter]键确认。
3.4.3
流动相比例设定 Method画面上,将光标置于流动相混合比率设定的栏内,在A-D上,用数字键输入所需流动相的混合比率,按[Enter]键确认。
3.4.1
柱温设定 Method画面上,将光标置于柱温箱温度设定栏,用数字键输入柱温箱所需的温度,按[Enter]键确认。

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岛津LC-2010A型HPLC操作规程.doc

3.5 更换流动相并排气泡
3.5.1 将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
3.5.2 逆时针转动泵的排液阀180°,打开排液阀;
3.5.3 在Method画面上,按[purge]键      显示清洗设定的上托画面,pump键旁的绿指示灯亮,输液泵开始工作。
3.5.4 依次按下使用的流动相通道和冲洗液通道的功能键,即流路A   
、流路B          、流路C          、流路D          及自动进样的冲洗液                                     
            ,泵大约以8ml/min的流速冲洗,清洗完成后自动停止。
3.5.5 将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
3.5.6 如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。
3.5.7 如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗3min后再按[pump]键停泵,重新接上柱并将流速重设为规定值。
3.6 平衡系统
3.6.1 按《Easy3000色谱数据工作站操作规程》打开“Easy3000色谱工作站”软件,输入实验信息并设定各项方法参数后,等待系统平衡。
3.6.2 等度洗脱方式
3.6.2.1 按泵的[pump]键,泵启动,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积(约30min)的流动相。
3.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
3.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按3.5.6操作。
3.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
3.6.3 梯度洗脱方式
3.6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件,按3.6.2项下方法平衡系统。
3.6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。方法:具体操作详见LC-2010A操作说明书34页3.4.6梯度洗脱的设定。
3.7 进样
3.7.1 进样前按检测器[zero]键调零,按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点。
3.7.2 按下系统控制器面板上的Run键,系统自动进样。
3.8 清洗柱及进样系统和关机
3.8.1数据采集完毕后,关闭检测器,继续以工作流动相冲洗20min后,(如流动相含缓冲盐,换为不含缓冲盐的同比例流动相在冲洗20min),再换用纯水冲洗系统及色谱柱至少60min,最后用甲醇或乙腈冲洗至少30min。
3.8.2 冲洗完柱后,将整个流路都置于有机溶剂中,按3.5.4清洗整个流路及进样系统。   
3.8.3 清洗完成后,先将流量降到0,关闭电源开关。
3.8.4 每次实验完毕,均需更换循环瓶中的水。
3.8.5 认真填写仪器使用记录。
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3.5 更换流动相并排气泡
3.5.1 将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
3.5.2 逆时针转动泵的排液阀180°,打开排液阀;
3.5.3 在Method画面上,按[purge]键      显示清洗设定的上托画面,pump键旁的绿指示灯亮,输液泵开始工作。
3.5.4 依次按下使用的流动相通道和冲洗液通道的功能键,即流路A   
、流路B          、流路C          、流路D          及自动进样的冲洗液                                     
            ,泵大约以8ml/min的流速冲洗,清洗完成后自动停止。
3.5.5 将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
3.5.6 如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。
3.5.7 如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗3min后再按[pump]键停泵,重新接上柱并将流速重设为规定值。
3.6 平衡系统
3.6.1 按《Easy3000色谱数据工作站操作规程》打开“Easy3000色谱工作站”软件,输入实验信息并设定各项方法参数后,等待系统平衡。
3.6.2 等度洗脱方式
3.6.2.1 按泵的[pump]键,泵启动,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积(约30min)的流动相。
3.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
3.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按3.5.6操作。
3.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
3.6.3 梯度洗脱方式
3.6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件,按3.6.2项下方法平衡系统。
3.6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。方法:具体操作详见LC-2010A操作说明书34页3.4.6梯度洗脱的设定。
3.7 进样
3.7.1 进样前按检测器[zero]键调零,按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点。
3.7.2 按下系统控制器面板上的Run键,系统自动进样。
3.8 清洗柱及进样系统和关机
3.8.1数据采集完毕后,关闭检测器,继续以工作流动相冲洗20min后,(如流动相含缓冲盐,换为不含缓冲盐的同比例流动相在冲洗20min),再换用纯水冲洗系统及色谱柱至少60min,最后用甲醇或乙腈冲洗至少30min。
3.8.2 冲洗完柱后,将整个流路都置于有机溶剂中,按3.5.4清洗整个流路及进样系统。   
3.8.3 清洗完成后,先将流量降到0,关闭电源开关。
3.8.4 每次实验完毕,均需更换循环瓶中的水。
3.8.5 认真填写仪器使用记录。
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3.5 更换流动相并排气泡
3.5.1 将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
3.5.2 逆时针转动泵的排液阀180°,打开排液阀;
3.5.3 在Method画面上,按[purge]键      显示清洗设定的上托画面,pump键旁的绿指示灯亮,输液泵开始工作。
3.5.4 依次按下使用的流动相通道和冲洗液通道的功能键,即流路A   
、流路B          、流路C          、流路D          及自动进样的冲洗液                                     
            ,泵大约以8ml/min的流速冲洗,清洗完成后自动停止。
3.5.5 将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
3.5.6 如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。
3.5.7 如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗3min后再按[pump]键停泵,重新接上柱并将流速重设为规定值。
3.6 平衡系统
3.6.1 按《Easy3000色谱数据工作站操作规程》打开“Easy3000色谱工作站”软件,输入实验信息并设定各项方法参数后,等待系统平衡。
3.6.2 等度洗脱方式
3.6.2.1 按泵的[pump]键,泵启动,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积(约30min)的流动相。
3.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
3.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按3.5.6操作。
3.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
3.6.3 梯度洗脱方式
3.6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件,按3.6.2项下方法平衡系统。
3.6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。方法:具体操作详见LC-2010A操作说明书34页3.4.6梯度洗脱的设定。
3.7 进样
3.7.1 进样前按检测器[zero]键调零,按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点。
3.7.2 按下系统控制器面板上的Run键,系统自动进样。
3.8 清洗柱及进样系统和关机
3.8.1数据采集完毕后,关闭检测器,继续以工作流动相冲洗20min后,(如流动相含缓冲盐,换为不含缓冲盐的同比例流动相在冲洗20min),再换用纯水冲洗系统及色谱柱至少60min,最后用甲醇或乙腈冲洗至少30min。
3.8.2 冲洗完柱后,将整个流路都置于有机溶剂中,按3.5.4清洗整个流路及进样系统。   
3.8.3 清洗完成后,先将流量降到0,关闭电源开关。
3.8.4 每次实验完毕,均需更换循环瓶中的水。
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