主题:【在线讲座33期】液相色谱柱使用疑难问题解析(答疑结束)

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plexu
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原文由 cpumxl(cpumxl) 发表:
plexu您好!我有以下问题想请教:
我用的是C18柱,后面黑色的是我以前跑的图,前面是我现在跑的图形,完全一样的东西,只是流动相不是一批配的(流动相的成分没变),中间柱子别人用过了,峰型怎么发生了这么大的变化啊?可能的原因是什么啊?是不是柱子出了问题啊?谢谢!


从两个图对比很明显可以看出是柱效严重下降,且伴有肩峰。不同时间配的流动相,如果成分和pH没变的话,肯定不会造成这个结果。估计是别人用柱子过程中,造成了柱头塌陷、柱头污染以及固定相流失等严重问题,如样品太脏,流动相或样品pH太高或太低,都会造成这个结果。
你可以试着用色谱柱清洗和再生的方法反冲维护一下,但不能保证一定能回到原来的效果。再生如果不行,考虑挖补柱头填料,实在不行,柱子也只能报废。建议柱子最好还是专门用于一种方法比较好,像你这种情况,都搞不清别人怎么用柱子的,分析解决问题就相当难。
ykfx0
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plexu您好!我有以下问题想请教,
请问:……
plexu您好!我想提问:流动相中加入四氢呋喃对柱子有损害吗?我现在分析一样品流动相中用到20%的四氢呋喃才能把峰分到基线.但柱子只能用一个星期分离效果就不好了.请问是四氢呋喃损坏了柱子吗?
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2010/8/4 14:42:59 Last edit by emoc98311
毛毛儿
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Plexu你好:
我想问一下,在用液相色谱同时分离多种组分时,怎么通过条件色谱条件使各个峰达到比较理想的分离效果!
plexu
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原文由 毛毛儿(yangxy12345) 发表:
Plexu你好:
我想问一下,在用液相色谱同时分离多种组分时,怎么通过条件色谱条件使各个峰达到比较理想的分离效果!


325楼已经回答过这个问题。
xue2009
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Plexu:关于碱性条件使硅氧键断裂,生成硅醇基,你能给我些资料看看吗?谢谢
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2010/8/4 15:15:41 Last edit by xue2009
tmh
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plexu您好!我有以下问题想请教,
请问:
1.我有一根C18的长柱,购来时检测还好,检测完后冲洗保存在乙腈中.但过了几个月再来用时,不管检测什么样品均有前延,按工程师的方法处理过还是不见好.2.是样品过载问题,按药典检测方法检验一些药品有关物质时,都要注入高浓度的供试液,这样往往使得柱过载而峰变形,按老师的方法减小浓度和注入量均是不允许的,怎么处理这问题?
plexu
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原文由 xue2009(xue2009) 发表:
Plexu,关于碱性条件使硅氧键断裂,生成硅醇基,能给我些资料看看吗?谢谢

不好意思!暂没有找到专门讲Si-O键如何断裂形成硅醇基的资料,目前有的资料只提到:高pH值时硅胶基质溶解,是氢氧根离子进攻Si-O键使其断裂的结果。我想色谱领域只涉及到这一层机理就够了,具体断裂细节应该是无机化学研究的。一下子也没有很多时间去找这个领域的资料,不过我以后会留意的,找到后一定第一时间给你看,麻烦把你的邮箱站内短信发给我。
liuyuan198815
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原文由 plexu(plexu) 发表:
原文由 liuyuan198815(liuyuan198815) 发表:
原文由 xue2009(xue2009) 发表:
原文由 liuyuan198815(liuyuan198815) 发表:
plexu您好!我有以下问题想请教:
我在用乙腈作流动相时,只要那个乙腈比例稍高一点,比如20%,即使测量波长高于乙腈截止波长比较多,也会产生比较大的溶剂峰,这怎么回事?

我估计不是有机相的问题,而是水相的问题,你水相用的什么缓冲盐?


没用缓冲盐也一样的,我上次用乙腈:水(35:65)作流动相也一样的,检测波长288


你的溶剂峰是正峰还是负峰呢?


正峰
liuyuan198815
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原文由 plexu(plexu) 发表:
原文由 xue2009(xue2009) 发表:
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plexu您好!我有以下问题想请教:
我在用乙腈作流动相时,只要那个乙腈比例稍高一点,比如20%,即使测量波长高于乙腈截止波长比较多,也会产生比较大的溶剂峰,这怎么回事?

我估计不是有机相的问题,而是水相的问题,你水相用的什么缓冲盐?


没用缓冲盐也一样的,我上次用乙腈:水(35:65)作流动相也一样的,检测波长288

用流动相溶解样品,解决你在这个问题

确实如此,如果样品溶剂和流动相溶剂不一致,可能会有溶剂峰出现,有时也会造成峰拖尾。


但规定不是用那个流动相溶解提取样品的,那怎么办呢
qiuzhidelu
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plexu您好!我有以下问题想请教,
 请问:哪些原因会造成色谱峰变宽、峰高变低,有哪些解决办法?谢谢!
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