主题：【在线讲座33期】液相色谱柱使用疑难问题解析(答疑结束）

原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:

原文由 qiuzhidelu(qiuzhidelu) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
　请问：哪些原因会造成色谱峰变宽、峰高变低，有哪些解决办法？谢谢！

这个主要还是柱子本身的柱效低了

原文由 风的海洋(wphlr) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：

我在做方法开发的时候,用乙腈和水作为流动相,在调整梯度的时候发现,刚开始用60%乙腈, RT为2.5分钟,调到40%乙腈,RT没有变化,30%也没有变化,一直调到20%的时候,RT突然变到了约13分钟,请问这是什么原因?我用的是离子交换柱.

原文由 20051975(20051975) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
想请您具体说明一下反冲色谱柱的方法，是不练检测器吗？

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 xue2009(xue2009) 发表:
Plexu，关于碱性条件使硅氧键断裂，生成硅醇基，能给我些资料看看吗？谢谢

不好意思！暂没有找到专门讲Si-O键如何断裂形成硅醇基的资料，目前有的资料只提到：高pH值时硅胶基质溶解，是氢氧根离子进攻Si-O键使其断裂的结果。我想色谱领域只涉及到这一层机理就够了，具体断裂细节应该是无机化学研究的。一下子也没有很多时间去找这个领域的资料，不过我以后会留意的，找到后一定第一时间给你看，麻烦把你的邮箱站内短信发给我。

原文由 xue2009(xue2009) 发表:
plexu您好！正相硅胶柱一般保存在什么溶剂里面比较合适？

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 xue2009(xue2009) 发表:
Plexu，关于碱性条件使硅氧键断裂，生成硅醇基，能给我些资料看看吗？谢谢

不好意思！暂没有找到专门讲Si-O键如何断裂形成硅醇基的资料，目前有的资料只提到：高pH值时硅胶基质溶解，是氢氧根离子进攻Si-O键使其断裂的结果。我想色谱领域只涉及到这一层机理就够了，具体断裂细节应该是无机化学研究的。一下子也没有很多时间去找这个领域的资料，不过我以后会留意的，找到后一定第一时间给你看，麻烦把你的邮箱站内短信发给我。

我在刘国诠老师的《色谱柱技术》第二版一书中第135页找到了硅氧键断裂生成硅羟基的方程式：

如果把M换成H离子，就是水解生成两个硅羟基。

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
1、请问怎么测柱效？怎么评价柱效？理论塔板数怎么计算？柱子填料是SinoChrom ODS-BP 5um ，规格4.6mm*200mm
2、我用苯试了一下，峰性大大好，但是不知道理论塔板数，不知道怎么评价，感觉不大好，对称性不好，有点前延，柱子才用了四个月，是什么原因呢？是不是塌陷了呢？有什么补救的办法吗？
3、流动相里之前有酸的，做完后单纯用乙腈冲洗，能把酸冲洗干净吗？之前他们是这样冲的，现在怀疑柱子塌陷了，会不会是长时间在酸性环境中造成的呢？

之前提问过的，没有看到回答结果，请大家见谅。

在284楼已回答。这里有我的问题，有时候公司事务比较多，回答有些滞后，希望大家见谅！

原文由 xue2009(xue2009) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：
1、请问怎么测柱效？怎么评价柱效？理论塔板数怎么计算？柱子填料是SinoChrom ODS-BP 5um ，规格4.6mm*200mm
2、我用苯试了一下，峰性大大好，但是不知道理论塔板数，不知道怎么评价，感觉不大好，对称性不好，有点前延，柱子才用了四个月，是什么原因呢？是不是塌陷了呢？有什么补救的办法吗？
3、流动相里之前有酸的，做完后单纯用乙腈冲洗，能把酸冲洗干净吗？之前他们是这样冲的，现在怀疑柱子塌陷了，会不会是长时间在酸性环境中造成的呢？

之前提问过的，没有看到回答结果，请大家见谅。

第一个问题没什么好讲的，就是来标准物质测。第二个问题，前延的问题主要有几个原因，1：样品溶剂强度大于流动相强度；2：样品过载；3：柱子用水冲后未用有机相平衡造成C18“倒伏”，补救的办法你对着看吧。第三个问题，有酸干嘛不用水冲下呢，纯有机相怎么能冲洗干净。综上考虑我建议你把柱子好好维护下，用异丙醇或甲醇好好冲下。

原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:

原文由 wkfei1128(wkfei1128) 发表:

原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:

原文由 xue2009(xue2009) 发表:

原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
请问：我们有一台waters1525色谱仪，最近基线总是呈现波浪形很有规律，波长越小越明显，梯度洗脱时向上飘逸而且后一段时间呈现波浪形，很影响分析，我想问一下，是不是柱子的原因，用的是C18上海安普的？麻烦了1

你看压力稳定不？我估计很有可能是柱子的问题，柱子里面有强保留性物质，建议先把柱子清洗干净，用甲醇或者异丙醇冲洗，不接检测器。

您好！我换了一根新柱子可还是出现上述情况，请问还有哪些原因能够造成上述情况，能给解析一下么？谢谢，各位操作液相色谱的没出现过上述情况么？

你好，我用的也是waters1525色谱仪，
你用的什么流动相呀
我以前也是基线慢慢往下漂
调了流动相，好些了

我用乙腈时230nm是向下漂移，后来为了节省成本用甲醇230nm向上飘，飘得都很厉害，影响检测，270nm还可以。你有过这情况么？我没什么经验希望可以交流一下，谢谢！