主题:【讨论】谈谈pH值的大小对液相色谱的影响

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大部分人做液相色谱,都会去注意PH值这个问题,可是你到底了解多少呢?

谈谈pH值的大小对液相色谱的影响

1、pH值的大小对液相色谱的影响通常都有哪些表征?

2、pH值的大小对液相色谱仪器有哪些影响?

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采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分子形式存在;对弱碱,情况相反。分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸;分析弱碱样品时,通常在流动相中加入少量弱碱。另外色谱柱都有一定的耐受范围,在流动相的配制过程和使用过程中不能超过色谱柱的耐受范围,否则会损害色谱柱。
luyisxu2222
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在实际方法开发过程中,我们其实很少能知道化合物的pKa,但是我们至少应该能知道化合物的结构,能初步的判断其酸碱性。如果化合物是中性分子,那么其保留基本不会因为流动相的pH变化而变化;另外还有一些化合物,其虽然带有酸碱基团,但是也对流动相的pH变化不敏感。我曾经做6-溴-2-氨基吡啶及其异构的HPLC方法开发,在我调整流动相pH以调整分离度的过程中,发现其中一个异构就是如此。
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