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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】急求！关于区带毛细管电泳不出峰的问题

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wjtang8498
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2010/9/4 23:04:20 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
清洗管子么？就是用氢氧化钠，水，缓冲液冲洗么？每次进样前都会进行这些步骤啊，PH还有要考虑的么，4-9都用过了，就是不见峰啊
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sunpengwjh
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2010/9/5 22:50:18 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wjtang8498(wjtang8498) 发表:
清洗管子么？就是用氢氧化钠，水，缓冲液冲洗么？每次进样前都会进行这些步骤啊，PH还有要考虑的么，4-9都用过了，就是不见峰啊

是每次进样之间的清洗管子，楼主做这个样品从来没有出过峰是么？
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sxwxy
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2010/9/6 15:08:04 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这种情况我也遇到过，那会儿一直用磷酸缓冲液一直不出峰，后来换做硼酸缓冲液就出峰了。你要不也试试更换一下缓冲液。
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2010/9/13 0:20:49 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
每次进样之间也有冲洗管子，不过很简单的冲洗两分钟左右，因为考虑到每次运行程序都还会有水洗-碱洗-水洗-缓冲液洗这样的步骤，就没有冲很久了。
这个样品从未出峰，缓冲液试了很多啊 硼砂试过，醋酸，磷酸盐，Tris都有试过
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2010/9/13 19:38:10 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wjtang8498(wjtang8498) 发表:
每次进样之间也有冲洗管子，不过很简单的冲洗两分钟左右，因为考虑到每次运行程序都还会有水洗-碱洗-水洗-缓冲液洗这样的步骤，就没有冲很久了。
这个样品从未出峰，缓冲液试了很多啊 硼砂试过，醋酸，磷酸盐，Tris都有试过

改变一下电极的方向呢？也可以试试压力进样后，停下来，用压力推，看看出不出峰！
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wjtang8498
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2010/9/14 2:21:22 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
压力进样后，停下来，用压力推，具体怎么操作呢？是压力进样后手动停下程序运行，然后手动控制用缓冲液冲管子么？
  另外，压力进样时，一般都是0.5psi，5sec 这个需要考虑改变么？
  多谢指教！！
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2010/9/14 6:35:10 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wjtang8498(wjtang8498) 发表:
压力进样后，停下来，用压力推，具体怎么操作呢？是压力进样后手动停下程序运行，然后手动控制用缓冲液冲管子么？
  另外，压力进样时，一般都是0.5psi，5sec 这个需要考虑改变么？
  多谢指教！！

进样的方式不需要改变，这样做主要看一下样品有没有问题，在您设置的条件下，会不会出峰！
具体的操作就像您说的！压力进样，停下来，再用冲柱子那样用缓冲溶液冲洗！
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wjtang8498
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2010/9/17 11:50:27 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先非常感谢大家给的建议！！我试了下压力进样后用缓冲液冲洗，可惜不出峰，担心是机器有问题，还用苯酚跑了一下，结果正常出峰。估计样品有问题，但这个是标准品啊，本身结构带有吡啶环啊，液相色谱别人也做了啊 紫外检测应该没问题啊 难道还要衍生化么 不解
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2010/9/17 19:30:44 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wjtang8498(wjtang8498) 发表:
首先非常感谢大家给的建议！！我试了下压力进样后用缓冲液冲洗，可惜不出峰，担心是机器有问题，还用苯酚跑了一下，结果正常出峰。估计样品有问题，但这个是标准品啊，本身结构带有吡啶环啊，液相色谱别人也做了啊 紫外检测应该没问题啊 难道还要衍生化么 不解

用的是不是就是空管柱子？
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2010/9/18 0:31:35 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是的  就是河北永年的 无涂层的裸柱，我怀疑是不是有可能样品的检出限太高，标样浓度太低了的缘故，我是把标样（100ug/ml）稀释10倍，感觉这浓度挺大啊
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