主题:【讨论】色谱柱冲洗方面的几个问题

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阿三
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原文由 环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:
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我们冲柱的时候流速和实验时的一样;
一般我们根据走柱子的流动相来选择冲柱的溶液,比如流动相是85:15甲醇水溶液用的是纯甲醇冲柱,流动相是50:50甲醇水溶液用的是85:15甲醇水溶液冲柱。


为什么这样冲柱呢?

可能是说85%的足够了~
不过我倒想问一下,最后保存在85%的里面?
保存在85%应该没问题的
19861005
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原文由 Vigorous(liuzhenhua87913) 发表:
仪器信息网确实让我们长不少见识!我该多向大家学习学习!
呵呵,都是精英啦,学习大家的意见
19861005
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1,在含有缓冲盐流动相的使用情况下,我和楼主操作的差不多啊,先水后有机的原因是,首先要除去缓冲盐,然后再用有机相冲柱子以除去强保留物质和其他杂质(反冲)。另一个原因:毕竟绝大多数C18柱是不能长时间使用水流动相的,用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。另外水保存色谱柱容易长菌。当然冲柱子不一定是纯水,可以是高比例的水吧。
2,流速大些,时间就可以短些,反之,流速小,那么时间就要长点。流速和实验时一致还是变小呢?这个请高人来回答一下。时间长短,肯定要根据冲洗的目的----是日常维护还是已经污染的柱子。

大家有什么不同意见?


用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。这个纠正能力应该有限吧。[/quote这个没有听说过,好像柱子塌陷后,只能填一下在用
19861005
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这么说有机系冲洗除了为了保存色谱柱还有修复色谱柱的功能啦?!
呵呵,可能是吧,以后得注意一下
阿三
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原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:
1,在含有缓冲盐流动相的使用情况下,我和楼主操作的差不多啊,先水后有机的原因是,首先要除去缓冲盐,然后再用有机相冲柱子以除去强保留物质和其他杂质(反冲)。另一个原因:毕竟绝大多数C18柱是不能长时间使用水流动相的,用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。另外水保存色谱柱容易长菌。当然冲柱子不一定是纯水,可以是高比例的水吧。
2,流速大些,时间就可以短些,反之,流速小,那么时间就要长点。流速和实验时一致还是变小呢?这个请高人来回答一下。时间长短,肯定要根据冲洗的目的----是日常维护还是已经污染的柱子。

大家有什么不同意见?


用有机相再冲一遍柱子可以及时纠正由于水冲洗柱子产生的临时相塌陷。这个纠正能力应该有限吧。[/quote这个没有听说过,好像柱子塌陷后,只能填一下在用
说的是相塌陷 呵呵
19861005
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原文由 环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:
没加缓冲盐,直接甲醇就行吧~
加了先用含水系统冲吧~
都说不能用纯甲醇,我觉得没什么区别~
如果加了缓冲盐,可以先用5%--10%甲醇冲洗40分钟,然后在用甲醇冲
阿三
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原文由 19861005(19861005) 发表:
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这么说有机系冲洗除了为了保存色谱柱还有修复色谱柱的功能啦?!
呵呵,可能是吧,以后得注意一下
当然有了 可以清楚强保留的物质防止污染吗
19861005
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原文由 阿三(junqiwudi) 发表:
原文由 环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:
没加缓冲盐,直接甲醇就行吧~
加了先用含水系统冲吧~
都说不能用纯甲醇,我觉得没什么区别~
我也总听说最好别用纯甲醇冲柱 但我们总这么做 呵呵
呵呵,不要限于实验室的手法,可以尝试一下
19861005
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原文由 可爱宝贝(xiaoguodong) 发表:
最后保留在柱子里的是纯甲醇
纯甲醇的话,保存的时间过长,会干柱的,最好不用纯甲醇,含一定水,会更好
19861005
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原文由 环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:
这个,请专家来解释,我也弄不明白。


感觉这个没什么好解释的~
加快流速,可以理解为相同时间内,冲洗的保留时间加快,故容易冲出杂质~
其实的说法。。。实在想不到,另外,其实这种解释,很牵强~
我感觉和流速没啥太大的关系,流速小,就多冲会,流速大就少冲会,杂质早晚都会出来
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