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主题：【求助】4个标准品却出现5个峰

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tbw113

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发表于：2010/09/18 19:29:32 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最近在分离4个混标，但是却出现5个峰，改变缓冲液的PH时，有时候又只有4个峰，缓冲液用的是硼砂。
出现过在同一缓冲体系下分别重复进样，第一次出现4个峰，第二次出现5个峰，第三次和第四次第五次均只有3个峰，不知道是什么原因？？？
而且最奇怪的是混标里多出那个峰已经确定不是体系峰，混标是50%甲醇溶解的。
求助各位大侠~~~~~

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2010/9/19 10:14:51 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

改变PH峰的数目发生改变的话，说明混标里有对PH敏感的物质。可以查一下文献确定一下。
至于同样条件下连续进样出峰数目不一样，很有可能是你的冲洗条件太弱，或者是进样量太大。前一种情况可以增加碱冲洗的时间，后者的话可以降低进样压力或时间，还可以配置低浓度的样品。
50%甲醇溶解的样品区带遇到硼砂很容易析出来形成所谓的鬼峰，所以降低溶解样品用溶剂里甲醇的比例很关键。

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2010/9/19 13:22:09 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请教一下楼上的大侠，为何进样量的大小会影响出峰的多少呢？
不管量大或量少，只要有那种物质不是都会出峰么？

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2010/9/19 15:11:23 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tbw113(tbw113) 发表:
请教一下楼上的大侠，为何进样量的大小会影响出峰的多少呢？
不管量大或量少，只要有那种物质不是都会出峰么？

进样量过大的话，再加之冲洗条件不强的话，会引起样品在管壁上残留进而在下一次分离的时候进行二次电迁移，从而导致鬼峰的出现。
道理很简单，假定一种物质在一定电压下电迁移的速度是恒定的，那么有二次迁移的那部分样品相当于延长了迁移时间，从而出现迁移时间改变。
比较好的方法是将四个样品分别作样进针，有利于后面的成分比对。

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