最近新买的ZORBAX SB-AQ柱才用一周,光做做一些标准样品和2个稀释的水解样品,就出现双峰(原来一个峰裂分为大-小峰)现象,问题出在哪里?
虽然了解到双峰有很多可能原因,我当时是一个个排除,先是怀疑标准品分解或者互变异构体(确实有)的相互转化,但是重新配置标样后还是存在双峰现象;接着怀疑流动相,降低流动相中缓冲盐的浓度(因为是在提高浓度后出现的),也还是存在。第三,怀疑柱子容量有限,出现过载,降低进样量和进样浓度,还是存在。
怀疑柱子保留了很多目标化合物,但进空白样却未有目标物质信号出现;用大量流动相(缓冲液,还有甲醇)反复冲洗,双峰出现变化,大峰变高、变尖,小峰变矮、接近基线并类似拖尾。
问题还是没有根除,本想反冲保护柱,后来决定先换一个保护柱看看。
结果,问题还真是出在保护柱上(但若说保护柱脏了,可柱压一直保持不变)。
换了保护柱,一切OK了。
但究竟保护柱怎么了?如果只做几个标准样品,保护柱就不行了,那这个方法没法做下去。
那根用过的保护柱有办法再利用吗?
如有高见,请不吝赐教!谢谢!