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主题：【求助】FMOC-Cl衍生化试剂问题

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ohwey
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发表于：2010/10/23 23:36:19 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：已退还积分 状态： 无最佳答案
在使用FMOC-Cl分析血浆中colistin药物的时候遇到FMOC-Cl衍生化试剂的问题。
本身使用perkin elmer HPLC系统搭配FL detector，C18 column，mobile phase使用ACN:THF:H2O=87:4:13，流速1ml/min，萤光Ex:260nm Em:315nm。
衍生化试剂FMOC-Cl本身具有萤光且易潮解产生FMOC-OH，当配制FMOC-Cl 100mM溶於ACN内打入HPLC时图谱有许多干扰峰，如图
就自我认知上peak可能有一FMOC-Cl再加上FMOC-OH两者，但结果却有好多peak产生，重复配制数次结果皆相同，这是正常的现象吗？这样的情况不知道有没有办法避免？15分钟前的梯型peak有办法去除掉吗？干扰太多没有办法进行下一步的分析样品。希望能赶快解决单纯将FMOC-Cl打入HPLC却产生许多peak的问题，麻烦给我指导，让我有一絲曙光吧！

10/25
感谢大家的回复，首先在FMOC-Cl方面已购置新的FMOC-Cl(sigma)，并且也有分装至多个样品瓶保存，於秤药时皆拿取少量之样品瓶为优先，起初也是怀疑FMOC-Cl不纯与损耗而购置新的试剂，对於量的比对如下图所示分别为1nM与100pM

先感谢大家费尽心思与时间的解答。请多多指教！还是希望可以赶紧解决
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2010/10/24 18:05:40 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
FMOC-Cl衍生化试剂是不是加的太多了，减少用量试试，最好做了试剂加入量的对比
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naranjo
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2010/10/24 18:34:26 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
配FMOC的时候注意ACN易挥发，并把FMOC分装在多个进样瓶中比较好吧，还有买现成的试剂试试看？
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老多_小多
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2010/10/24 21:41:11 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
FMOC-Cl衍生化试剂是不是加的太多了，减少用量试试，最好做了试剂加入量的对比

100mM好像是很大
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〓猪哥哥〓
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2010/10/24 22:45:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
FMOC-Cl样品是不是本身就不纯？
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ohwey
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2010/10/26 21:04:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不晓得衍生化试剂是不是很容易裂解。
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zhouxuan_y
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2012/9/23 13:56:35 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问楼主这个问题解决了吗？我最近也遇到这个问题，头大得很！
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影子706
v3205964
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2017/9/6 14:00:34 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
想问下楼主后来是怎么解决这个问题的？我也遇到这样的问题了
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