原文由 geebzbz(geebzbz) 发表:
原文由 艺泰安邦(foumy) 发表:
1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
新买的不用活化的,活化后吗分离效果更好点。
2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
应该有点吧,不过这个在视觉上不太明显吧,没太仔细观察过。
3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
加压吗分离效果会好点,没有加压泵就手动加压呗,我们以前都是手动加压,后来嫌太累,做了个氮气加压的装置,省力,哈哈!
4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?
流速会有影响,不过这个还要看你硅胶目数、载体高度、洗脱剂等等对分离效果都有影响的。
5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
当然是可以,有钱的话买个制备色谱会更爽。
谢谢这么仔细的回答!
手动加压,怎么做的啊?对这种自己改进的实验方法,我非常感兴趣,望不吝赐教啊!
柱子不是有磨口吗,可以买一个叫做加压头的玻璃器具,然后用一根软管连接,再买个双链球,接上就可以了,记着塑双链球和软管之间配个放气阀(我们以前叫放气阀),这样压力大了就可以手动缓慢放气。不至于一下子崩掉造成柱子里的硅胶开裂。