实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8042707今日发帖：564 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
生命科学仪器综合讨论
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】检测水溶性蛋白相关问题？谢谢！

浏览0 回复4 电梯直达
lfxfj2012
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2010/11/08 11:23:19 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问有谁知道什么是隆丁法，应该是检测水溶性蛋白的，需要电子版，请问哪位前辈有呢？
该帖子作者被版主 省部重点实验室加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励新人 \(^o^)/~
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
dong3626
dong3626
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/11/8 19:23:11 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
隆丁法是用来区分蛋白质，区分为高分子、中分子、低分子蛋白质的吧？
该帖子作者被版主 gl19860312加 1积分， 2经验，加分理由：O(∩_∩)O谢谢 参与
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
省部重点实验室
gl19860312
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/11/12 19:25:09 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
检测水溶性蛋白？？

可以经过一定的处理程序 将蛋白提纯 并溶解在水中

然后 测定最大的吸收峰

当然 蛋白质量的测定 有很经典的哪几种( ⊙ o ⊙ )啊！
该帖子作者被版主 gl19860312加 1积分， 2经验，加分理由：O(∩_∩)O谢谢 参与
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
省部重点实验室
gl19860312
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/11/12 19:33:38 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原理：高分子含氮物质在酸性溶液中，易为单宁所沉淀。磷钼酸可同时沉淀高、中分子含氮物质。低分子含氮物则不为上述物质所沉淀。因此，光侧单宁沉淀样品后所得滤液的含氮量，从总氮减去此值即得高分子氮。在测磷钼酸沉淀样品后所得滤液的含氮量。用单宁沉淀样品所得滤液的含氮量减去低分子氮，即为中分子氮。

　　仪器

　　(1) 总氮测定仪器 见大麦总氮测定的仪器。

　　(2) 恒温水浴 20+0.1℃。

　　试剂

　　(1) 总氮测定用试剂 见大麦中总氮测定试剂。

　　(2) 硫酸，比重1.4 100克硫酸加入92克水中。

　　(3) 单宁溶液 溶16克单宁于100毫升水中。

　　(4) 钼酸钠溶液 溶50克钼酸钠于100毫升水中。

　　操作

　　(1)用单宁沉淀

　　A 加100毫升样品(使其内含约80毫克左右氮)于一200毫升容量瓶中，加水到180—185毫升，加比重1.4硫酸4毫升，摇匀。

　　B 置容量瓶于20℃水浴中，保温15—20分钟，加10毫升单宁溶液，加水至刻度，摇匀，立即用折叠滤纸过滤，此滤液可重复过滤，直至滤清。

　　(2)用磷钼酸沉淀

　　A 加100毫升样品(使其内含约80毫克左右氮)于200毫升容量瓶中，加水到175毫升左右，加10毫升磷钼酸溶液，摇匀。

　　B 置容量瓶于20℃水浴中，保温15—20分钟，加10毫升比重1.4硫酸，加水至刻度。摇匀后按上述方式过滤。

　　(3)取四只消化管，第一个为空白，第二个加入5.00毫升未吸收的麦汁，第三个加入5.00毫升单宁吸收过的麦汁，第四只加入5.00磷目酸吸收过的麦汁，四只管分别加入适量的催化剂、15毫升浓硫酸，同做总氮消化、蒸馏、滴定，分别测氮含量。

　　计算

　　三个区分中氮含量分别为：

　　P(总氮)=14*N*V*20

　　T(单宁吸收后麦汁中的氮)=14*N*V

　　M(琳目酸吸收后麦汁中的氮)=14*N*V

　　A (N,毫克/100毫升)=P-T*200/5*100/100

　　B (N，毫克/100毫升)=(T-M)*200/5*100/100

　　C (N，毫克/100毫升)=M*200/5*100/100

　　三个区分中含氮量在总氮中占的百分比分别为：

　　A区分=A/P*100%

　　B区分=B/P*100%

　　C区分=C/P*100%

　　式中P—100毫升样品中总氮含量(毫克)

　　T—用单宁沉淀后50毫升滤液中含氮量(毫克)

　　M—用磷钼酸沉淀后50毫升滤液中含氮量(毫克)

　　A—100毫升样品中高分子氮的含量(毫克)

　　B—100毫升样品中中分子氮的含量(毫克)

　　C—100毫升样品中低分子氮的含量(毫克)

　　V—消耗盐酸溶液的体积

　　N-0.02摩尔/升盐酸标准溶液的摩尔浓度

　　说明

　　(1) 用单宁沉淀高分子氮对温度的变化非常敏感，最好实验室温度能保持近似20℃。若用单宁沉淀后不能立即过滤，则在继续操作前，应在20℃ 放置15分钟。在低于20℃时，滤液能重新混浊，甚至可以形成沉淀，这沉淀不能用过滤法除去。在测定滤液的含氮量前应充分摇匀。

　　(2) 硫酸和钼酸钠(NaMoO4.2H2O)作用生成钼酸，然后和试样中存在的磷酸盐作用生成磷钼酸，这样生成的磷钼酸作沉淀剂比市售的磷钼酸还好，因此操作中一般不直接加入磷钼酸，而用硫酸和钼酸钠代替。

　　结果表示方法

　　以%表示之，取一位小数。

　　正常范围值

　　A区分：25%左右

　　B区分：15%左右

　　C区分：60%左右
该帖子作者被版主 gl19860312加 10积分， 2经验，加分理由：感谢 即使 应助 O(∩_∩)O谢谢交流
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
proteintech
proteintech
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/3/24 11:23:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很专业，顶个
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】检测水溶性蛋白相关问题？谢谢！
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁