样品:丝蛋白加四氧化三铁。
所用仪器:S-4800 日立
测试条件:加速电压 1KV 发射电流 2UA 工作距离 3.3MM
难点: 1.蛋白十分的脆弱普通的加速电压和发射电流都会对它造成损伤,采用正常的条件基本无法聚焦、消像散,样品会很快被破坏。因此只有降低条件。采用1KV加速电压和2UA的发射电流,可是这样8MM的工作距离信号太弱了。因此要把工作距离调小,但是四氧化三铁易被磁化而影响电子束所以工作距离又不易离得物镜过近选择3.3MM。
2. 即便在1KV和2UA的电子枪条件选择下,样品也不易在高倍率下调整,10万倍以上的调整都会对样品造成损伤。所以选择在1万倍以下调整焦距和消像散,调整好亮度对比度(不能以这时的亮度和对比度为准,还要放到10万倍先观察)再拉到10万倍以上拍照
3. 样品在电子束的轰击下很不稳定,图像的漂移十分的厉害。正常的TV模式成像已经得不到较为清晰的照片,只能采用FREEZ后直接保存。因此图片噪点比较大,而且信号损失的比较严重。不过基本上可以看到四氧化三铁(10几到20几纳米)在丝蛋白的分布情况,团聚情况了。
这个是我目前遇到的能够处理好的难做样品之一了,所以图像虽然不是太理想我也保留下来作为自己的资料保存。
![]()