主题:【求助】菌悬液怎么确定含菌数

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去年冬天
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药典附录上说的菌液制备“上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每一毫升含菌数为50~100cfu的菌悬液”这一句话中,菌悬液是怎么确定含菌数为50~100cfu?
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hj312112
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以前做实验时配置过一定浓度的菌液,做法是:先估计配置一个高浓度的(具体浓度未知)菌悬液,菌悬液的体积要确定,然后去一定体积(比如1mL)的菌悬液用平板稀释计数法确定出菌悬液的含菌浓度。最后就是按照希望达到的菌悬液浓度相应的稀释就好了

不知道这个方法对你有没有启示?
hj312112
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如果测出来预先估计配置的菌悬液浓度低于所希望配置的菌悬液浓度的话,本人就采取用离心机的办法,即将菌悬液离心后除上清液(虽然会损失一点菌,但大部分的菌还是浓缩在离心管里),然后再加入少量的溶液重新配制浓度高的菌液。一般情况,这样做还是可以达到所希望的,呵呵。
雾非雾
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菌悬液的含菌数,应该是梯度稀释,涂平板、计数之后算出来的吧。
雾非雾
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原文由 去年冬天(7336167) 发表:
药典附录上说的菌液制备“上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每一毫升含菌数为50~100cfu的菌悬液”这一句话中,菌悬液是怎么确定含菌数为50~100cfu?


可能是按经验来做的,因为加无菌氯化钠溶液的量没有说,那就是根据经验加氯化钠溶液的量,这个量的多少可能是之前试过,然后计算过的。个人理解。
影子
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菌悬液的含菌数,应该是梯度稀释,涂平板、计数之后算出来的吧。


是的,我们一般做三个稀释级别来确定最终的浓度
去年冬天
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原文由 hj312112(hj312112) 发表:
以前做实验时配置过一定浓度的菌液,做法是:先估计配置一个高浓度的(具体浓度未知)菌悬液,菌悬液的体积要确定,然后去一定体积(比如1mL)的菌悬液用平板稀释计数法确定出菌悬液的含菌浓度。最后就是按照希望达到的菌悬液浓度相应的稀释就好了

不知道这个方法对你有没有启示?


嗯 说得有道理
我试试看
谢谢!
去年冬天
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原文由 雾非雾(mcds) 发表:
原文由 去年冬天(7336167) 发表:
药典附录上说的菌液制备“上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每一毫升含菌数为50~100cfu的菌悬液”这一句话中,菌悬液是怎么确定含菌数为50~100cfu?


可能是按经验来做的,因为加无菌氯化钠溶液的量没有说,那就是根据经验加氯化钠溶液的量,这个量的多少可能是之前试过,然后计算过的。个人理解。


非常感谢!
那我先多做几次找找规率
雾非雾
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原文由 影子(hyheying) 发表:
原文由 雾非雾(mcds) 发表:
菌悬液的含菌数,应该是梯度稀释,涂平板、计数之后算出来的吧。


是的,我们一般做三个稀释级别来确定最终的浓度


我们以前是做六个稀释度,选后三个,因为前三个太密,没法计数。
miss_fairy
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有专门的菌液浓度比浊管,将菌液稀释成与比浊管比对基本一致,再根据说明中该菌种的对应浓度设计并稀释到所需浓度范围,在使用的同时,取一毫升到培养基中培养,最后数出具体数目。
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