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液相色谱（LC）

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主题：【求助】求帮忙分析一下我的HPLC图

浏览0 回复27 电梯直达

jy010422

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发表于：2010/11/17 17:21:06 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

流动相是：
A：H20（含0.1%TFA） B：乙腈（含0.1%TFA）

洗脱条件均为：
A（%） B（%）
0min 95 5
10min 95 5
60min 0 100
70min 0 100
流速为1ml/min；

我没上样品，是用超纯水空跑的，为什么出现这么多峰呢？
我用了两根不同的柱子试过，并且也重新更换过流动相了，可跑出来的图还是这样，为什么呢？

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2010/11/17 17:29:36 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

检测波长是多少，超纯水都不要进，也就是什么都不要进，直接采集梯度基线看看，如果还是这样，把色谱柱拆下，换上阻尼管再采集梯度基线，以检查是不是系统污染，流动相问题等。

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2010/11/17 17:29:56 Last edit by xky0230699

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2010/11/17 18:14:39 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
检测波长是多少，超纯水都不要进，也就是什么都不要进，直接采集梯度基线看看，如果还是这样，把色谱柱拆下，换上阻尼管再采集梯度基线，以检查是不是系统污染，流动相问题等。

波长是225nm，什么是阻尼管？谢谢！

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有水有渝

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2010/11/17 18:19:16 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

阻尼管就是你有没有多余的不锈钢管路，找一个接上去就行了，实在没有直接接一个双能接头也行。

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ychunhai

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2010/11/17 19:48:16 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果是第一次这样是正常的。如果要走高梯度，一般会高有机相洗一次。如果不进样走的第二次还这样，那很可能是系统污染了，一般是流动相，可能是乙腈或TFA。可能TFA污染了取用工具造成的。用未开封的TFA，用干净的移液管直接移取，洗耳球也可能会污染（里面有液体什么的）。有些未开封的TFA也不好，可能厂家分装的时候用的橡胶或塑料被腐蚀了，最好能用另一批号的。

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