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主题：【求助】waters1525—2996 梯度 基线波动

浏览0 回复11 电梯直达
樱雪川 北冥
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发表于：2010/11/17 18:37:40 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
小弟是第一次做蛋白质和多肽的分离，参考了一个流动相，A:WATER 0.1%TFA ,B:ACN/WATER 80:20 0.1%TFA ，从95:5开始，一直到50:50，效果虽然不太好但基线是没问题的，但从今天开始，平衡柱子时就发现基线开始不稳了，就像是有气泡一样，PURGE也没用，不知是设么原因，求助

注：1.1525的集成脱气机已经坏了，但流动相已经抽过 超过了。
      2.听说含三氟乙酸的流动相很容易有气泡，是这样吗？
      3.本人用的样品是一种抗生素发酵液，里面的成分比较复杂，所以加了一根普通的c18保护柱，不知道会不会把样品中的大分子蛋白质给滤掉，而影响结果
      4.另外问一个很弱的问题.....pda检测器的噪音是不是比紫外的要大啊？还有大家平时都把2996的参数设成多少？（empower2 ，我的是英文版....费劲了）最好给个图
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2010/11/17 23:53:01 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主上传一个图谱吧
pda的检测器相比紫外噪音稍微大点，但是没有显著影响，不影响实验
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2010/11/17 23:53:15 Last edit by 03yx2
flyaway
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2010/11/18 10:45:02 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
检测器后加一段反压，试试看
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flyaway
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2010/11/18 10:45:45 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
另外问一下楼主，检测波长？
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樱雪川 北冥
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2010/11/18 13:28:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 flyaway(flyaway) 发表:
另外问一下楼主，检测波长？

254是没问题的，但到了210就不行了
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樱雪川 北冥
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2010/11/18 13:29:50 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
另外说明，单独跑一个通道或两个通道跑统一流动相也是没问题的，所以我怀疑是不是混合的问题
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樱雪川 北冥
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2010/11/18 13:32:14 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
还有一个问题，三氟乙酸和氟乙酸的效果有什么区别啊？
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Insm_67f06569
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2018/11/28 16:02:15 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
使用waters1525做多糖含量测定时，出现很有规律的基线，并且进标品后无峰出现，请教这是什么原因呢
该帖子作者被版主 bingwang228加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
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dadgoh
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2018/11/28 17:37:40 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
停泵看一下基线能平吗？平了就是流通池有异物或气泡。需要清洗流通池及憋压除气泡。
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言逊
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2018/11/29 6:45:28 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Insm_67f06569(Insm_67f06569) 发表:使用waters1525做多糖含量测定时，出现很有规律的基线，并且进标品后无峰出现，请教这是什么原因呢
这种一般考虑有气泡，才会这么有规律的波动
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夏天的雪
bingwang228
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2018/11/29 8:38:19 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的什么检测器

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