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主题：【分享】应用EXCEL绘制标准曲线

浏览0 回复42 电梯直达
叶子
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发表于：2010/11/19 13:51:30 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
【转】
整体思路：在ELISA实验结束后，我们得到的是经酶标仪读出的标准品以及样本的OD值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的OD值及其相对应的浓度，以OD值为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。这样，我们把样本的OD值以X值代入，便可求出Y值，即样本浓度。

下面我们就一步步来实现这个目标:

1. 首先，将数据整理好输入Excel，分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。



2. 拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY散点图”，并选择子

图表类型的“散点图”（第一个没有连线的）。如下图所示。



3. 点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如

果是纵向列表就改选“列”。



在做ELISA标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本OD值是已知的，因此，我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到，横坐标X值为OD值，纵坐标Y为标准品浓度，这正是我们想要的。

4.有时需要我们手动选择X值，这时可以点击“系列”来更改，如下图。



如果要对横坐标和纵坐标进行掉换，我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标，结果如下图：



出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整X或Y。

5.调好之后，然后点击“下一步”出现图表选项界面，如下图。



6.点击“下一步”，在弹出的窗口再点击“完成”现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。



7.到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊？

其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上)，然后单击右键，点击“添加趋势线”。如下图:



8.弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图。



9.在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或接近直线，我们就选择“线性”，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该直线的方程就是y=ax+b的形式。不过，一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的，也就是说不是一条完全的直线，这时我们可以选择“多项式”，多项式后面还有“阶数”的选项，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选“2阶”，即出来的方程为y=ax2+bx+c.



选择完毕后，弹出以下窗口



10.趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来，我们需要将公式显示出来，以根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后出现下图的样子即线由很多点标识出来），单击鼠标右键，选择趋势线格式



11.我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选择显示公式，显示R方，即相关系数，这时公式与R方值便都显示出来了。



我们将样本的OD值作为X代入上述方程，求出来的便为浓度值了，哈哈。

一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到0.99以上，本例中为0.9999,非常不错的曲线，这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。
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zyt1986421
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2010/11/19 13:57:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
厉害啊，分享了
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叶子
xiaoanxiaoye
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2010/11/19 14:32:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
终于发成功了，一发没了，害得我又发了一遍，粘得我手都累了
嘻嘻
希望对大家有点帮助
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leogoal
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2010/11/19 15:07:38 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
虽然早就会了，还是感谢楼主分享！
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ldgfive
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2010/11/19 15:51:51 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是一个EXCEL上的应用，非常实用
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祥子
nemoium
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2010/11/19 17:13:50 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常详细的解释。

谢谢叶子。

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cgl2201
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2010/11/20 10:30:32 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感谢楼主分享!
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qiuxingwei
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2010/11/20 10:47:23 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
呵呵，写论文的时候作图应用的最多了，还有各种细致的应用啊，
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鸿雁
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2010/11/20 11:16:40 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
辛苦了小叶子，学习了
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zhz6688
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2010/11/20 12:25:52 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习了.EXCEL对我们的学习确实有用,倡导大家在这些方面开发大用处.
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star_05240721
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2010/11/20 19:22:07 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不错的方法，学习ING......
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