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毛细管电泳（CE）
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主题：【讨论】HSA跑毛细管电泳出两个峰

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cjb6812343
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发表于：2010/11/26 17:28:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大家好，我现在在用毛细管电泳跑人血清白蛋白HSA，但是会出两个峰，问一下这是因为HSA不纯吗？  论坛里有没有人做过HSA血清白蛋白的毛细管电泳的呢？  另  现在HSA在sigma由于进口监管，不能订货，大家一般到哪里订这个呢？
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2010/11/26 20:47:08 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是不是有对映体呀？
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青林
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2010/11/26 20:52:49 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你用对照品跑了不？
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spying
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2010/11/28 18:12:46 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
标准出了两个峰？迁移时间怎么样？
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userwzy
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2010/11/29 9:31:14 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
什么样的两个峰,峰高,峰面积还有迁移时间怎样,我认为一般蛋白样品,纯度一般都相对较低.
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sunpengwjh
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2010/11/29 20:04:59 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 userwzy(userwzy) 发表:
什么样的两个峰,峰高,峰面积还有迁移时间怎样,我认为一般蛋白样品,纯度一般都相对较低.

我们购买的蛋白也是纯度不是很高！
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cjb6812343
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2010/11/30 22:15:02 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 userwzy(userwzy) 发表:
什么样的两个峰,峰高,峰面积还有迁移时间怎样,我认为一般蛋白样品,纯度一般都相对较低.

你好，那两个峰的出峰时间相差几分钟，  在254nm，前面一个峰的面积大约是后面一个峰面积的1倍；而在280nm，前面一个峰的面积是后面一个峰的一半，好郁闷。  我的蛋白是从台湾买的， 写了大于99%，用于琼脂凝胶电泳
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userwzy
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2010/12/1 9:32:52 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cjb6812343(cjb6812343) 发表:
原文由 userwzy(userwzy) 发表:
什么样的两个峰,峰高,峰面积还有迁移时间怎样,我认为一般蛋白样品,纯度一般都相对较低.

你好，那两个峰的出峰时间相差几分钟，  在254nm，前面一个峰的面积大约是后面一个峰面积的1倍；而在280nm，前面一个峰的面积是后面一个峰的一半，好郁闷。  我的蛋白是从台湾买的， 写了大于99%，用于琼脂凝胶电泳


你有没有做全波长扫描？ 蛋白一般有两个吸收峰，一个在280nm左右，另外一个在低波长处，这可能就是为何你的两个峰在254和280nm，峰面积比不同的原因。
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capillaryze
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2010/12/1 16:57:02 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
http://pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/ac061059c
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heguang
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2010/12/7 23:42:34 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很有可能是蛋白标样不纯。你再用琼脂糖电泳跑一下，如果两个条带，就肯定是标样不纯了（产品质量问题），如果只有一个条带，那就是表样标准定的太低。
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