主题：【求助】请问有专门的柱子做绿原酸吗？

做绿原酸关键看你色谱条件，一般的色谱柱都可以把它所有的同分异构体分开的，给你一个条件您可以参考一下，关于UPLC的方法也有普通BEH C18就可以了。
1。HPLC mobile phase A
Into a 2000 mL screw-capped bottle pour 1840 mL of water (HPLC Grade) and 160 mL of acetonitrile (HPLC Grade). Add 2mL of orthophosphoric acid (Analytical Grade). This solution is stable for 1 month when stored at room temperature.
2。HPLC mobile phase B
Into a 1000 mL screw-capped bottle pour 500 mL of water (HPLC Grade) and 500 mL of acetonitrile. Add 2 mL of orthophosphoric acid (Analytical Grade). This solution is stable for 1 month stored at room temperature.
3。HPLC conditions
Start-up the HPLC system with the following conditions:
Column: Spherisorb C18 ODS-1
Injection volume: 20 µl
Column temperature: ambient, No column thermostat is needed provided that the temperature does not fluctuate more than 5°C within the run of the analytical sequence.
Flow rate: 1 mL/min using the following gradient
Mobile phase: as stipulated under § 6.2 and § 6.3 applying the following gradient (Table 1)

Table 1. HPLC Gradient conditions
Time (min)        Mobile phase A (%)        Mobile phase B (%)
0        98        2
15        88        12
25        50        50
30        30        70
35        30        70
37        98        2
45        98        2

Detection: 325 nm

原来小贺啊，嘿嘿！
你说的太笼统了，帮你补充一下吧：
1.标准：2010版药典
2.条件：
  柱子    YMC PACK ODS-A C18
  流动相  甲醇-水-冰乙酸-三乙胺（18：85：1：0.3）
  柱温    35-40度
  流速    0.8ml/min
  仪器    Agilent1200
3.问题：
  （1）主峰本就有点拖尾，主峰后有个杂质峰和其混在一起分不开，一般看不出来，加在一起就像是一个拖尾严重的峰，其实是两个成分，分不开！
  （2）样品在120min左后有个大的杂质峰，我们采集时间设为15min，在大批量连续进样到8针左右，这个杂质峰就会出来，把基线抬的很高（15min的采集时间里有一半都受影响），控制不好就会和绿原酸峰重叠到一起，影响测定。
4.提问：
  （1）有没有相关经验的人给推荐个更适合的柱子，使绿原酸峰不拖尾，而且能把那个杂质峰给分离出来。
  （2）有没有好的方法解决那个120min出来杂质峰，前提是不冲柱子。

原文由 wdl158160(wdl158160) 发表:
原来小贺啊，嘿嘿！
你说的太笼统了，帮你补充一下吧：
1.标准：2010版药典
2.条件：
  柱子    YMC PACK ODS-A C18
  流动相  甲醇-水-冰乙酸-三乙胺（18：85：1：0.3）
  柱温    35-40度
  流速    0.8ml/min
  仪器    Agilent1200
3.问题：
  （1）主峰本就有点拖尾，主峰后有个杂质峰和其混在一起分不开，一般看不出来，加在一起就像是一个拖尾严重的峰，其实是两个成分，分不开！
  （2）样品在120min左后有个大的杂质峰，我们采集时间设为15min，在大批量连续进样到8针左右，这个杂质峰就会出来，把基线抬的很高（15min的采集时间里有一半都受影响），控制不好就会和绿原酸峰重叠到一起，影响测定。
4.提问：
  （1）有没有相关经验的人给推荐个更适合的柱子，使绿原酸峰不拖尾，而且能把那个杂质峰给分离出来。
  （2）有没有好的方法解决那个120min出来杂质峰，前提是不冲柱子。

不用换柱子试一下上面的流动相和梯度条件就可以了，我做的时候进很多样品都没有干扰

原文由 wdl158160(wdl158160) 发表:
原来小贺啊，嘿嘿！
你说的太笼统了，帮你补充一下吧：
1.标准：2010版药典
2.条件：
  柱子    YMC PACK ODS-A C18
  流动相  甲醇-水-冰乙酸-三乙胺（18：85：1：0.3）
  柱温    35-40度
  流速    0.8ml/min
  仪器    Agilent1200
3.问题：
  （1）主峰本就有点拖尾，主峰后有个杂质峰和其混在一起分不开，一般看不出来，加在一起就像是一个拖尾严重的峰，其实是两个成分，分不开！
  （2）样品在120min左后有个大的杂质峰，我们采集时间设为15min，在大批量连续进样到8针左右，这个杂质峰就会出来，把基线抬的很高（15min的采集时间里有一半都受影响），控制不好就会和绿原酸峰重叠到一起，影响测定。
4.提问：
  （1）有没有相关经验的人给推荐个更适合的柱子，使绿原酸峰不拖尾，而且能把那个杂质峰给分离出来。
  （2）有没有好的方法解决那个120min出来杂质峰，前提是不冲柱子。

1、采用梯度分
2、第8针冲洗柱子，如果长期停留在色谱柱，压力也会变化

绿原酸很好做，我们也经常做，我们没有用专用柱子

原文由 wangkun0538(wangkun0538) 发表:
绿原酸很好做，我们也经常做，我们没有用专用柱子

哦,那你们分析的什么样品中的绿原酸呢,流动相是什么配比的?

1、采用梯度分
2、第8针冲洗柱子，如果长期停留在色谱柱，压力也会变化

我们采用的就是8针一冲柱子,采用梯度得做方法验证,麻烦,药典也不允许!

采用梯度得做方法验证?