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液相色谱（LC）

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主题：【求助】分析发酵液中的苹果酸，草酸，柠檬酸和酒石酸，应该选择气相还是液相？

浏览0 回复7 电梯直达

koala2007

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发表于：2011/03/02 17:15:50 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1。文献上多数人用液相来测定有机酸，为何不用气相呢？
2。应该选用何种分离柱子啊？
3。网上看到有专门分离小分子有机酸的液相色谱柱，多少钱？哪个公司的最好的？

俺不懂。谢谢各位前辈啦！

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2011/3/26 13:08:19 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可能用离子色谱柱或是氨基柱要好些

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知足常乐！

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ID：wenshaowei-2008

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2011/3/31 15:09:22 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有机酸还是用液相色谱来检测比较方便

色谱柱主要有AQ-C18或者LP-C18，月旭公司的柱子

LZ有什么疑问，欢迎随时电话联系13659899051

QQ：342832185

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天天洗碗

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2011/4/3 22:17:19 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

多数文献上会表明用哪种类型的色谱柱吧

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省部重点实验室

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2011/12/26 16:37:15 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液相检测

3.3.1 流动相的配制

（1）溶液A：用磷酸盐缓冲液（H₃PO₄+KH₂PO₄）将超纯水调节pH至2.2

（2）流动相：乙腈：溶液A=2%：98%

（3）将配好的流动相置于溶剂过滤器中过滤，然后在超声波清洗器下进行超气。

3.3.2 样品预处理

（1）取1ml发酵液10,000r/min离心5min；

（2）取上清0.5ml,加入0.3gNaCL, 0.10ml 2.3mol/L H₂SO_4,2.50ml乙醚，在振荡器上混合1min，5,000r/min 离心3min；

（3）取乙醚相1.00ml,加0.20ml0.1mol/LNaOH混合1min，5,000r/min离心3min,吸去上层乙醚，用试纸测试pH>9（在酸性条件下，用乙醚萃取，将有机酸以分子形式萃取到乙醚相中，再在pH>9的条件下反萃取到水相中，可大大去除其他物质的干扰），开盖挥发乙醚相后，置干燥器内干燥；

（4）加入2.5ml 0.02mol/LKH₂PO₄（pH2.2）溶解，10,000r/min离心10min；

（5）取1.5ml0.45µm膜过滤注入样品瓶，取10μl进样分析。

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fmh718

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2012/1/6 11:34:47 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 省部重点实验室(gl19860312) 发表:
液相检测

3.3.1 流动相的配制

（1）溶液A：用磷酸盐缓冲液（H₃PO₄+KH₂PO₄）将超纯水调节pH至2.2

（2）流动相：乙腈：溶液A=2%：98%

（3）将配好的流动相置于溶剂过滤器中过滤，然后在超声波清洗器下进行超气。

3.3.2 样品预处理

（1）取1ml发酵液10,000r/min离心5min；

（2）取上清0.5ml,加入0.3gNaCL, 0.10ml 2.3mol/L H₂SO_4,2.50ml乙醚，在振荡器上混合1min，5,000r/min 离心3min；

（3）取乙醚相1.00ml,加0.20ml0.1mol/LNaOH混合1min，5,000r/min离心3min,吸去上层乙醚，用试纸测试pH>9（在酸性条件下，用乙醚萃取，将有机酸以分子形式萃取到乙醚相中，再在pH>9的条件下反萃取到水相中，可大大去除其他物质的干扰），开盖挥发乙醚相后，置干燥器内干燥；

（4）加入2.5ml 0.02mol/LKH₂PO₄（pH2.2）溶解，10,000r/min离心10min；

（5）取1.5ml0.45µm膜过滤注入样品瓶，取10μl进样分析。