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液相色谱（LC）
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主题：【求助】造成色谱峰分叉的原因有那些

浏览0 回复23 电梯直达
枪手怪蜀黍
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发表于：2008/02/18 09:10:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如题，最近我的HPLC出现峰分岔，但总是找不到问题的根源，求助！
我这台液相是致敏染料（ADD）和甲醛用同一根柱子做的，若先做完ADD再做甲醛就会出现峰分叉，但是仅仅是衍生剂的峰分叉其他峰不分叉，即甲醛峰不分叉，但是若按此时做校准曲线去测量样品，曲线斜率变大所得的结果会偏大20%左右。
找到问题根源了,跟ADD没有关系,是自己没有经验,我的样品中的剩余的衍生剂浓度过大导致峰形过饱和.
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2008/2/18 9:11:20 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是柱头脏了吧。
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xydell
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2008/2/18 10:10:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
预柱的问题吗?这个原因好象满多的
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caoyin9512
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2008/2/18 10:14:09 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看是不是每一个峰都在同一位置出现分叉。如果答案是肯定的，说明与柱子的关系比较大。

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2008/2/18 10:14:57 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 septyaya 发表:
如题，最近我的HPLC出现峰分岔，但总是找不到问题的根源，求助！



换过不同品牌的柱子吗
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2008/2/18 10:51:31 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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Last edit by nnsss
枪手怪蜀黍
septyaya
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2008/2/18 11:17:33 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 septyaya 发表:
如题，最近我的HPLC出现峰分岔，但总是找不到问题的根源，求助！

洗了多次柱子还这样，样品峰不分岔，溶剂峰会分岔，导致结果偏大。
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nnsss
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2008/2/18 13:12:37 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 septyaya 发表:
原文由 septyaya 发表:
如题，最近我的HPLC出现峰分岔，但总是找不到问题的根源，求助！

洗了多次柱子还这样，样品峰不分岔，溶剂峰会分岔，导致结果偏大。


结果偏高和此关系不大
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zzghy
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2008/2/18 13:39:34 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
也有可能是流动相配制的问题,或者时间久了.
还有是否用流动相当溶剂去溶解样品,单用有机溶剂溶样也有出现分岔峰.
建议重配一次或配制不同比例的流动相试一试.
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枪手怪蜀黍
septyaya
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2008/2/18 17:49:48 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
之前也出现过这个问题，柱子也没换过，有时梯度用流动相（乙睛：水：60：40）从0、0.1、0.3、0.5、0.7、1各隔5分钟梯度上升走过一遍，会解决问题。
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faanm00
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2008/2/18 19:07:31 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先柱子的问题，分离效果差了，柱填料老化塌陷都有可能造成这个问题
解决也很简单，找一点标准品萘溶液，走一针比对你柱子的说明书看峰位峰形，如果是和说明书上的图差很多就该换柱子了

其次是你的样品进样量太大太浓了，稀释稀释就行了

还有就是标品不纯或样品分离效果不好里边裹峰，或者流动项被污染

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