主题：【分享】BECKMAN 125型高效液相色谱仪使用的标准操作程序（SOP）

5.4. 更换流动相并排气泡
将管路的吸滤器放入装有流动相的储液瓶中，逆时针转动排液阀90-180°，打开排液阀；设流速为5ml/min，冲洗3min后设流速为0停泵，将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。如管路中没有气泡，则排气泡操作可省略；如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
5.5. 平衡系统
用流动相冲洗至基线漂移<0.001AU/min，噪声为<0.0005 AU时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。
5.6. 输入样品信息
点击“Control/Single Run”，在Sanple ID（样品名称）、Method（方法）、Data path（保存路径）、Data file（文件名）输入相应的信心，然后点击Submit提交。
5.7. 进样
在“Direct Control”界面点击AutoZero键调零；用进样针定量吸取样品溶液，在进样阀处于INJECT状态下插入进样针；逆时针转动进样阀手柄，在LOAD状态下推针进样，再顺时针转动进样阀手柄使其回至INJECT状态即完成进样操作。
5.8. 报告输出与打印
在主菜单对话框内右击Instrument图标，点击“open offline”进入离线分析界面。
5.8.1系统默认报告格式：点击“File/Data/New”打开相应文件后，点击“Report/View/Area%”。
5.8.2自定义报告格式：点击“File/Data/New”打开相应文件后，在该界面中单击鼠标右键，点击“Graphical programming/Define Peaks”，在色谱图中单击自定义峰的起始和终点位置，点击“File/Method/Save”进行方法保存；点击“Report/Analyze”，进行自定义报告的分析；点击“Method/Custom Report”，在弹出的界面中分别点击“Insert field”、“Insert Graph/Data Graph”和“Insert Report/Run Report”即可分别插入常规信息、图谱、数据，从而完成自定义报告。
完成报告输出后，点击“Report/Print/Area%”或者“Report/Print/ Custom Report”即可打印报告。
5.9 关机
5.9.1 测定完毕后，在Direct Control界面点击检测器图标关闭紫外灯。
5.9.2色谱柱的冲洗
5.9.2.1反相柱（C8、C18）：流动相含盐的（可将加酸、加三乙胺等情况并入），以乙腈－水（5：95）（乙腈可用甲醇代替，下同）冲洗30min（可视具体情况增加冲洗时间，下同），然后以乙腈冲洗20 min以上；流动相不含盐的，以流动相冲洗10 min以上，然后以甲醇冲洗20 min以上；流动相添加离子试剂的，以乙腈－水（5：95）冲洗45 min以上，然后以乙腈冲洗20 min以上。流速一般设为1ml/min。
5.9.2.2正相柱：流动相含盐的，以不含盐流动相冲洗30 min以上，再以正己烷冲洗20 min以上（如流动相极性与正己烷有较大差异，可在流动相冲洗后，以异丙醇低速冲洗进行过渡，注意以异丙醇为流动相流速不得超过0.5ml/min，下同）；流动相不含盐的，以流动相冲洗20 min以上，再以正己烷冲洗20 min以上。
5.9.3 停泵，逐级关闭工作站窗口，关闭计算机及仪器各部件电源开关。
5.10 填写仪器使用记录

6.注意事项
6.1 流动相及样品溶液必须用0.45um滤膜过滤，流动相还要进行脱气处理。
6.2进样量最少为定量环体积的3至5倍，即20μl的定量环最少进样60至100μl的样品，这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针配合20ul满环进样。
6.3 待泵的压力稳定后，方可开启检测器。
6.4 试验结束后，待泵的压力逐步降为0后，方可关闭泵的电源。
6.5 仔细阅读色谱柱说明书，保证色谱柱系统的适应性（流动相pH 2-8；柱压小于2.5 KPSI）。

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疯子，你用过贝克曼的液相啊，有木有更多资料可以分享下的