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液相色谱（LC）

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主题：【求助】液相色谱柱柱压升高

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aikan

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发表于：2012/08/20 20:12:14 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我使用的C18反相柱刚开始使用时柱压还好但是时间一长柱压升高了好多请问这是什么原因怎么解决

该帖子作者被版主蓝人加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖

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2012/8/21 8:01:44 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

预防柱压升高请注意以下几方面：
1）请使用保护柱，有条件可以在色谱柱入口处加一到二片筛板，并经常取出清洗或更换。
2）样品上机前经合适的滤膜过滤
3）生物样品经过蛋白质沉淀出去（不影响测试目标物）
4）使用尽可能低浓度的缓冲液，并正确冲洗系统（使用后）
仅供参考

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dakaitianchuang

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2012/8/21 9:16:51 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

同意楼上说法.
另外你的柱子用了多长时间了,峰形是否有变化,柱效是否降低了,考虑活化一下柱.

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yylianxin

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2012/8/21 11:26:24 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

到处拆拆冲冲洗洗更健康

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ixiaog

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2012/8/22 9:44:59 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

首先，你卸下柱子，看是不是仪器的压力是不是正常，很多时候不见得是色谱柱堵了。如果确定是色谱柱问题的话，你就只能多冲冲柱子吧，一般情况色谱柱是不会堵的，是不是使用了磷酸盐的流动相？？

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yukepotato

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2012/8/22 10:39:31 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

经常冲冲柱子，还有进样前处理下样品，或是装个预柱！

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秋醉虞阳

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2012/8/22 13:52:29 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

高了多少？柱压下午的比上午的要高，这个很正常。柱子使用时间久了，柱压肯定也会升高。也可能是其他地方压力高了，你可以从检测器开始查到泵那里。具体看看是哪里小堵

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asd2712362

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2012/9/16 17:36:06 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

样品前处理不好，仪器堵了。。

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蓝人

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2012/9/21 21:17:21 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

样品有没有过滤啊

压力高了多少？

流动相的变化有没有考虑进去

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wss5456

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2012/9/24 22:24:38 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

先检查一下吧，看究竟是柱子压力高还是仪器引起的；如果是柱子的话，很有可能是你的样品或者流动相引起的哈

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wenjunn

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2012/9/25 21:00:11 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱子在使用后，要用相同有机溶剂比例不含有酸碱的流动相冲洗。例如流动相是30%甲醇-0.1%醋酸溶液，那么使用后就要用<30%甲醇的流动相冲洗，一般0.5的流速冲洗半小时，这样做是为了保证将其中的酸碱等冲干净，防止关泵停流后，酸碱析出，如磷酸就容易析出的，一旦析出就麻烦了。
第二，使用时候建议装一个保护住，这样一些极性比较小的成分就会保留在最前端的保护住上，保护柱也是C18的填料。一般你分析的成分复杂的话，就会有一部分极性很小的东西保留强烈，如果你的流动相有机溶剂比例又比较小的话，那么极性小的成分就更加容易保留在柱子上，并且是柱子的前端，所以使用时间长之后也会柱压高的。
第三，好好处理样品，必要的微孔滤膜过滤，或者高速离心。
以上可以参考，柱压高还是因为使用的问题，多加注意就好。

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