主题：【极限体验&说出你的故事】二极管阵列检测器（DAD）应用技术交流

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东风恶

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发表于：2011/04/27 12:00:44 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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试验样品概述：
　【药品名称】
　　通用名称：注射用阿魏酸钠
　　英文名称：Sodium Ferulate for Injection
　　汉语拼音：Zhusheyong Aweisuanna
　　【成份】
　　本品中主要成分为阿魏酸钠，其化学名为：3－甲氧基－4－羟基桂皮酸钠盐二水合物。其结构式为：分子式：C10H9NaO4·2H2O 分子量：252.20
　　【性状】本品为白色或类白色结晶或结晶性粉末；无臭。
　　【药理毒理】本品为非肽类内皮素受体拮抗剂，可拮抗内皮素引起的血管收缩、升压及血管平滑肌细胞增殖，减轻血管内皮损伤；增加NO的合成，松弛血管平滑肌；抑制血小板聚集、抗凝血、改善血液流变学特征。本品亦可抑制胆固醇的合成，降低血脂，清除自由基，防治脂质过氧化损伤；影响补体，增强免疫机能，并有一定的镇痛、解痉作用。静注给药，小鼠半数致死量（LD50）为1.7g/kg。
【贮藏】遮光、密封保存。
主要试验材料：二极管阵列检测器（DAD）
应用
1、峰纯度测定（一般不能作为主成分峰是否单纯的验证方法），
原因：1）杂质的量很小对峰的贡献很小，对峰纯度指数的影响也很小，
2）主成分峰与杂质峰完全重迭或杂质的光谱与主成分相似
2、杂质测定波长的选择
试验用样品：过效期的样品，专属性试验破坏的样品、已知杂质等
检测波长：190-400nm(190-800nm)
监测波长：一般采用未端吸收的波长（如：220nm）,也可根据情况，多设几个波长；杂质的观察也可通过三维图谱色谱条件：

色谱柱：月旭色谱柱：SN:W10212096；PN：wei518425
阿魏酸钠性质：在水溶液中在287和310nm处有最大吸收，中国药典2010年版有关物质测定波长为322nm。注射剂局颁标准有关物质测定波长310nm。
middle

典型二维色谱图：从下图可以知道不同破坏试验产生杂质的时间以及个数。

典型二维光谱图：从下图可以知道主药的最大吸收波长。

1、有关物质订入标准一些规范。
方法建立注意：检测器的选用（灵敏度较高，不推荐用蒸发光检测器、示差检测器等）；强调灵敏度（配制灵敏度溶液，浓度主要参照报告限值）；波长选择（目前倾向于杂质数和峰面积，对于响应值差异大要权衡波长）；流动相选择（有机溶剂的选择要兼顾在末端吸收，比例不得少于5%；离子对浓度在0.005～0.02mol/L，缓冲盐浓度在0.02～0.05mol/L，注意pka值，梯度一般选择线性梯度）；保留时间一般为3～5倍，不能太长，有可能降低灵敏度，梯度变化直到杂质个数不在增加；样品处理最好是溶剂为流动相，供试液浓度在0.2mg/ml～20mg/ml，最好不得低于0.2mg/ml，若低于此浓度要充分的验证，允许供试液超载。对照溶液浓度最好为定量限的2～40倍，信噪比不小于10%，小于0.01%可以忽略不计（目的是有关物质杂质谱的重现于对比）。响应因子主要针对已知杂质（已知杂质浓度斜率与主药浓度斜率的比值）；稳定性要注意杂质个数和归一化法杂质含量变化。要注意原研和市场主流的原料药。系统耐用性试验，三个品牌的色谱柱，流动相比例变化（幅度为2～5%）pH值变化±0.2，柱温影响等。

2、目前趋势：注重分离度（峰纯度不是作为唯一的参考指标），仪器的灵敏度（建议配置灵敏度溶液测试仪器）和检出能力（注意检测限与报告限的关系）；注意物料的平衡（质量平衡），平衡程度在5～10%。注重杂质谱的比较。