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主题：【求助】在梯度洗脱的时候一般用多少柱体积平衡？

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inin笨笨猫
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发表于：2011/05/03 23:40:57 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如题：在梯度洗脱的时候，需要用初始比例冲洗，使系统回复到初始状态，请问这个梯度周期的平衡时间一般是多少？
有不少人说要用10~30的柱体积平衡，但是一般15cm*4.6mm的C18的一个柱体积是2.5mL，假如要用10个柱体积，用1mL/min的流速冲洗那不是起码半小时？难道每次进样后都平衡半小时才走下一个样？有点不符合实际，想问一下大家一般用多长时间平衡再进下一个样的？
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2011/5/4 8:36:45 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没算过，一般看基线，平直了就可以走下一个梯度了
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zhaohua8011
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2011/5/4 8:57:23 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般3倍的柱体积就可以，你也可以改变洗脱的梯度以节约时间！
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2011/5/18 10:49:36 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:
一般3倍的柱体积就可以，你也可以改变洗脱的梯度以节约时间！

假如是250mm的普通C18柱，1mL/min的流速就是大约7、8分钟，那好像也挺久的，你们平常做实验就冲那麽久？
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fayzua
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2011/5/18 16:30:18 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般是等压力回到起始之后再加5min
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有水有渝
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2011/5/18 16:59:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般从比例回复到初始比例后过10分钟
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雪妖
czj_1027
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2011/5/18 19:14:12 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般是会到初始比例15min（250mm）柱长
期间的平衡时间和填料的比表面积有很大的关系，比表面积越大，需要的时间就越长，如果平衡后走第二针的保留时间与第一针相差比较大的话，那中间的平衡时间就需要加长
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chwembiology
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2011/5/24 16:59:26 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般我们1-2个柱体积，压力回复稳定即可，25cm*4.6mm的C18 大概6分钟
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