主题:【讨论】晒晒氨基酸分析图谱……

浏览0 回复15 电梯直达
GG
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刚才看到一个帖子讲的是柱前衍生检测氨基酸法http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110422/3265100/index.shtml

那我们来晒晒柱后衍生法检测氨基酸吧?
要求:
1、有样品图谱(最好说明是什么样品的)
2、有分析条件
3、有试剂条件(原装进口的还是自行配制的)
4、分离柱条件(分离柱尺寸、原装柱还是自行填装后的)

我先来:



条件
1、培养基中氨基酸
2、蛋白水解法
3、仪器安装时带的原装试剂
4、仪器安装时带的原装柱子

稍后再传几张自己配置试剂和自行填装柱子后的图谱,还请大家多多指教啊!
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风烟
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分析离的不错啊!我们以前也有做过18种氨基酸分离,使用的是Waters 的分析包。
风烟
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yinbing
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如果自己配的缓冲液也能达到原装试剂的效果就好了
kylabs
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那来个LCMS的吧,没有衍生的,19种氨基酸
Method Run Conditions:
Column: 2.1 x 150 mm Cogent Diamond Hydride™
Solvent A: DI water + 0.1% formic (or acetic) acid
Solvent B: Acetonitrile + 0.1% formic (or acetic acid)
Flow rate: 0.4 mL/min
Gradient conditions:
    0 min - 100 %B
    0-5 min to 75% B
    5 - 6 min to 60% B
    6 - 7 min hold 60% B
    7 - 9 min to 50%B
    9 - 10 min hold 50%B
    5 min post time at 100%B (for equlibration)
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老多_小多
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原文由 kylabs(kylabs) 发表:
那来个LCMS的吧,没有衍生的,19种氨基酸
Method Run Conditions:
Column: 2.1 x 150 mm Cogent Diamond Hydride™
Solvent A: DI water + 0.1% formic (or acetic) acid
Solvent B: Acetonitrile + 0.1% formic (or acetic acid)
Flow rate: 0.4 mL/min
Gradient conditions:
    0 min - 100 %B
    0-5 min to 75% B
    5 - 6 min to 60% B
    6 - 7 min hold 60% B
    7 - 9 min to 50%B
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有样品处理的经验分享下吗
GG
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条件
1、这个是标准谱图,不是样品图谱
2、生理体液法120分钟
3、仪器安装时带的原装试剂
4、仪器安装时带的原装柱子
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GG
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条件
1、自己第一次配置试剂后的标品图
2、蛋白水解法
3、购买国产试剂,自己第一次配置
4、自己重新填装后的分离柱
色色猪
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1、这是标准品的谱图
2、分析条件:异硫氰酸苯酯衍生,自己的方法,不是分析包
3、试剂条件:国产普通试剂
4、分离柱条件:岛津自带原装C18柱子,25cm
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2011/5/16 16:40:37 Last edit by huangqining
GG
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原文由 色色猪(huangqining) 发表:
1、这是标准品的谱图
2、分析条件:异硫氰酸苯酯衍生,自己的方法,不是分析包
3、试剂条件:国产普通试剂
4、分离柱条件:岛津自带原装C18柱子,25cm

可否说下,一根C18的柱子能做多少个样啊?
kylabs
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原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
原文由 kylabs(kylabs) 发表:
那来个LCMS的吧,没有衍生的,19种氨基酸
Method Run Conditions:
Column: 2.1 x 150 mm Cogent Diamond Hydride™
Solvent A: DI water + 0.1% formic (or acetic) acid
Solvent B: Acetonitrile + 0.1% formic (or acetic acid)
Flow rate: 0.4 mL/min
Gradient conditions:
    0 min - 100 %B
    0-5 min to 75% B
    5 - 6 min to 60% B
    6 - 7 min hold 60% B
    7 - 9 min to 50%B
    9 - 10 min hold 50%B
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有样品处理的经验分享下吗


我估计这个样品是标样的结果。我见过相同分离条件做代谢组的,样品处理很简单,细胞培养液沉淀蛋白,离心,取上清,就直接做了。因为是TOFMS做的,所以不需要在意其他杂质的干扰。
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