主题:请教:如何检测微生物的数量???????

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qiuer
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请教:除了用平板计数法检测微生物的数量外,分光光度计能否检测出微生物的数量?
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rfu
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由广东省微生物研究所承担的广东省重点科技攻关项目——生物发光法微生物数量快速测定技术研究,日前通过了由广东省科技厅组织的成果鉴定。 

  ATP生物发光技术的原理是荧光素酶以荧光素、三磷酸腺苷和氧气为底物,在Mg2+存在时,将化学能转化为光能。ATP既是荧光素酶催化发光的必需底物,又是所有生物生命活动的能量来源。在荧光素酶催化的发光反应中,ATP在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系。研究表明,各生长期的细菌均有较恒定水平的ATP含量,因此,提取细菌的ATP,利用生物发光法测出ATP含量后,即可推算出样品中的含菌量,整个过程仅为十几分钟。由于生物发光法无需培养过程,操作简便、灵敏度高,在短时间内即可得到检测结果,因此具有其它微生物检测方法无可比拟的优势。 

  该成果从筛选和优化细胞ATP释放剂着手,通过微生物细胞ATP的释放机理研究,解除了ATP释放剂对发光测定体系的抑制作用,筛选和组合出微生物细胞ATP释放剂,实现了微生物细胞ATP的有效提取,建立了微生物细胞ATP提取技术
linkjoe
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原文由 rfu 发表:
由广东省微生物研究所承担的广东省重点科技攻关项目——生物发光法微生物数量快速测定技术研究,日前通过了由广东省科技厅组织的成果鉴定。 

  ATP生物发光技术的原理是荧光素酶以荧光素、三磷酸腺苷和氧气为底物,在Mg2+存在时,将化学能转化为光能。ATP既是荧光素酶催化发光的必需底物,又是所有生物生命活动的能量来源。在荧光素酶催化的发光反应中,ATP在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系。研究表明,各生长期的细菌均有较恒定水平的ATP含量,因此,提取细菌的ATP,利用生物发光法测出ATP含量后,即可推算出样品中的含菌量,整个过程仅为十几分钟。由于生物发光法无需培养过程,操作简便、灵敏度高,在短时间内即可得到检测结果,因此具有其它微生物检测方法无可比拟的优势。 

  该成果从筛选和优化细胞ATP释放剂着手,通过微生物细胞ATP的释放机理研究,解除了ATP释放剂对发光测定体系的抑制作用,筛选和组合出微生物细胞ATP释放剂,实现了微生物细胞ATP的有效提取,建立了微生物细胞ATP提取技术


国外已经用成熟产品,美国SDI公司的,可以到该公司网站上看一下。
http://www.sdix.com
gigiandjz
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分光光度法就可以,微生物含量和吸收值成正比.但是需要你做标准方程
changjianjun
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原文由 gigiandjz 发表:
分光光度法就可以,微生物含量和吸收值成正比.但是需要你做标准方程

也可以用微生物快速检测仪,时间上要比国标法快24-36个小时
zhouhua340
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我的实验室有台分析颗粒粒径大小的仪器,X—Ray Count:440KCNTS/S。请问对人体的伤害有多大。有防护罩,但为了试验能顺利进行,经常需要打开。是台有了8年的老设备。
7562736_
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用分光光度法检测活的微生物是不很准确的,有很多限制条件。比如取样的均匀度,检测时,装入比色皿的操作速度等等,很多问题都会导致不准确。如果是微藻的话可以通过提取其叶绿素的方法,然后检测叶绿素的吸光度的方法还是比较可靠的。
fangweidai
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原文由 7562736_ 发表:
用分光光度法检测活的微生物是不很准确的,有很多限制条件。比如取样的均匀度,检测时,装入比色皿的操作速度等等,很多问题都会导致不准确。如果是微藻的话可以通过提取其叶绿素的方法,然后检测叶绿素的吸光度的方法还是比较可靠的。

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