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主题：【求助】向达人们再次求教~

浏览0 回复4 电梯直达
zlovewei520
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发表于：2011/05/31 22:20:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天继续测试未知样的荧光特征峰。使用了两种溶剂甲醇和乙醇。使用了250nm的激发波长，以及292nm的激发波长。
一、先说说甲醇的问题。单独对色谱纯甲醇进行荧光扫描时，设定250nm的激发波长，荧光图谱在250nm处出现瑞利峰，其后在约336nm处出现一峰，再其后在500nm处出现二级瑞利散射。根据网上一名教授的论文，336位置应该是甲醇的特征荧光峰。但随后我使用了逐渐增加波长的办法进行检测，该峰出现了位移，当我使用400nm波长激发时，该峰位置后移，并且在200nm处出现了较大的信号峰。此峰与瑞利峰或许有一定关系，属于波长的1/2倍。以上这些问题我实在不明白，甲醇有没有荧光？如果有，荧光峰应该位置不变啊？如果没有，那336nm应该就是拉曼峰，那么文献错误？
二、乙醇的问题。和甲醇类似，在325nm位置存在最大荧光波长，似乎是拉曼峰，不过对比资料，250nm时应该不在这个位置。使用激发扫描，200-300未发现有最大激发波长。那么乙醇有没有荧光峰？如果有位置是不是326nm？如果没有，那么这个位置的拉曼峰怎么消除？
三、样品的问题。由于是未知样，能不能发荧光我都不知道，不过还是有点成果出来了。使用乙醇溶解样品后检测，扫描200-300激发，使用750nm的发射，获得292nm处得最大激发波长，其后使用292nm激发，做荧光发射扫描。问题出现，在320-340范围内出现了峰形，并且，在326nm处有峰平台，其后信号继续上升到336nm的峰顶位置。由其与乙醇292nm的图谱比较可以知道，这个位置应该不会是乙醇的拉曼峰，因为此时瑞利峰很小。那么这个位置是否就是荧光特征峰的位置呢？如果是的话，它与乙醇在此处的一个峰有叠加干扰，不知道有没有办法消除？
非常渴望达人能够指教~初次接触分子荧光，已经摸索了3天了，还是觉得没有头绪。

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2011/6/3 8:21:46 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好像都是假象
甲醇没有荧光峰！网络教授不可信
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2011/6/7 9:07:28 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可是未知样品在292nm处确实存在有最大激发波长，并且在337nm产生了强烈的发射。可以肯定这种发射不属于拉曼光。那这个问题如何解释啊？请达人指教一下。
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2011/6/8 7:38:11 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是否来自溶剂不纯？
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2011/6/8 9:23:53 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
前几天没有办法发图，今天把图发上来，请老师和达人指教。
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