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毛细管电泳（CE）

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主题：【求助】请问有没有用手动重力差进样的？

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plumbenben

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发表于：2011/06/15 16:43:31 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请问前辈有没有用手动重力差进样的？
用公式计算，管子内径是75µm，大约18s，10cm的高度差能进23nL的样品，也就是说5mm样品长度。如果等待180s，应该是5cm的样品，但是根本看不出来。
不知道是不是我操作有误，请问各位前辈有没有实际手动进样的经验？

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2011/6/15 22:06:43 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

要想知道进了多少，你可以在样品里加墨汁，进样后用这个工具来观察进样长度。

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plumbenben

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2011/6/16 19:19:16 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢呢！但是现在样品根本进不去。不知道哪里有问题，是不是毛细管里有一点空气，重力差进样都不能实现？

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heguang

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2011/6/17 0:15:47 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

是的，有气泡的时候要有足够大的压力才能进的进去。
有气泡在，阻力要大一些。
这个东西也能检查出是否有气泡的。

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2011/6/17 16:17:09 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

手动高差进样应该是可以的，较小的高差相对长的进样时间重现性也可以做的很好，不比商品化仪器上加压进样的效果差。
但是手动高差形成的压差较小，故管长、管径的均匀性、溶液的粘度等都影响效果，因此计算值往往准确度不高。
在管内有微小气泡时可以进样，可以使用观察这个气泡的方法看液体流动。但和没有时的流动速度差距很大。管内大气泡，或者管口有任何微小气泡或固体物时都不会进样，因为压力太小，表面张力和孔节流效应就足以平衡掉这个压力差。
不知道你如何判断的样品根本进不去，等了180s在5cm处没有看到信号？颜色？
而且不知道具体如何操作的，很难分析问题在哪里。
但是不必怀疑高差进不了样，更细的管子有一定粘稠度的溶液都是没问题的。而且10cm是很大的高差了，一般75的管子50cm长5cm高差就够用了。

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2011/6/17 21:54:08 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 SS(wangsl911) 发表:
手动高差进样应该是可以的，较小的高差相对长的进样时间重现性也可以做的很好，不比商品化仪器上加压进样的效果差。
但是手动高差形成的压差较小，故管长、管径的均匀性、溶液的粘度等都影响效果，因此计算值往往准确度不高。
在管内有微小气泡时可以进样，可以使用观察这个气泡的方法看液体流动。但和没有时的流动速度差距很大。管内大气泡，或者管口有任何微小气泡或固体物时都不会进样，因为压力太小，表面张力和孔节流效应就足以平衡掉这个压力差。
不知道你如何判断的样品根本进不去，等了180s在5cm处没有看到信号？颜色？
而且不知道具体如何操作的，很难分析问题在哪里。
但是不必怀疑高差进不了样，更细的管子有一定粘稠度的溶液都是没问题的。而且10cm是很大的高差了，一般75的管子50cm长5cm高差就够用了。

谢谢这么详细的解答。

因为还没有买到合适的光源，所以还不能用UV/Vis检测器判断。

先试着用墨水来进样，以便观察。先用甲基异丁基酮（和墨水不互溶）压力法冲洗毛细管，然后再把毛细管进样口插到装有墨水的小瓶里，之前都保持进样口出样口同一高度，此时墨水小瓶迅速抬高10cm，计时。
有时候墨水进样进得很好，有时就根本进不去。我考虑是不是我的毛细管再从两个小瓶中移动时进去了少量的气泡。已经折腾了好几天了，一筹莫展中。

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