主题：如何选择液相色谱仪（转贴《生命科学仪器》中文章

如何选择液相色谱仪
                          马明远
              （上海伍丰科学仪器有限公司）

液相色谱仪是个技术含量，价值都较高的产品。用户不可能对目前市场上所有产品都有较为深入的了解，在选购仪器时，往往不能客观的去判断这些产品到底孰优孰劣，大都凭着感觉，或者是产家和销售商的推荐。导致的结果是购买的仪器往往达不到要求，而且在使用过程中并没有产家和销售商介绍得那么好。

就上述情况，我们谈谈一台品质优良的液相色谱系统应该从以下几个方面考虑：
一：主要技术指标优异：
首先是如何看指标。液相色谱仪的技术指标很多，有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为首先要看主要技术指标。根据国家标准，仪器的主要指标有噪音、漂移、最小检测浓度，定性定量重复性等。而且这些指标都要放在系统，回路里去比较。简单来讲就是把各单元装置都要联接好：泵、检测器、色谱柱，进样阀等联结完后，还要通上流动相。因为您在日常工作中也都是联接好以后才可以进行分析的，而不只是用某个单元就可以进行分析工作的。所以我们不能只看某个单元的指标。
有的朋友也许会认为刚才列出的这些主要指标好像都是检测器的。对的，但是就前面所说条件是要放在整个回路和系统里去看去比较。例如：泵的脉动会直接影响噪音指标。泵的流量稳定性对定性定量的重复性指标好坏也有决定性作用。所以我们要放在系统里看指标。举个反例：某些公司在公布的指标中，噪音和漂移指标写的条件是空池或有的干脆不写。在这样的条件下，指标只单单表示了UV检测器光学和电气的特性，与实际情况相差甚远，并没有考验泵的压力脉动，液流回路的阻尼和UV检测器流通池的性能。
了解了考核这些指标的前提，我们再介绍以下这些主要指标。
1．噪音
是指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好，否则噪音过大将会导致基线不稳，甚至影响分析结果。

2．漂移
是指仪器稳定后一段时间内基线漂离原点的距离，通常用来衡量仪器稳定快慢。高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定，从而在一定程度上提高了分析效率。                         

3．最小检测浓度（最小检测限）
是反映仪器灵敏度的重要参数。
公式：CL=2Nd×C/H（CL ：最小检测浓度 Nd:噪音 C：样品浓度 H：样品峰高）
由上式可见，最小检测浓度和噪音成正比，与样品峰高值成反比。噪音值越小，最小检测浓度数值就越小，仪器灵敏度就越高。同样，样品峰高值越大，最小检测浓度数值就越小，仪器灵敏度也就越高。所以在同样的噪音值和样品浓度情况下，样品峰高值决定了最小检测浓度。峰高值越大，仪器灵敏度就越大，就可以检测到更微量的样品。某些仪器为了片面地去追求降低噪音指标，而样品的峰高值却随之降低（由于篇幅和技术上细节问题在此不多做解释，如需进一步探讨，欢迎致电我公司技术部）。最小检测浓度（最小检测限）数值并无因噪音值的降低而缩小，对仪器的灵敏度提高毫无意义。

4．定性定量重复性
主要是考核仪器稳定性的指标，这对于分析样品来说是非常重要的。好的仪器其稳定性应该是十分优秀的，这就要求多次进样保留时间及含量的一致性，这样做出来的结果才能使人信服。该指标的好坏很大程度上取决于泵的输液稳定性，泵的输液不稳定，定性定量重复性也就不好。

其它一个较为重要的指标---谱图展宽效应
该指标并没有在国家标准JJG705-2002液相色谱仪计量检定规程中单独列出。只在附录中的色谱柱性能测试提到。
我们先看以下的公式：
N=5.54×(tR/Wh/2)2 ×1000/L 
其中n--- 理论塔板数；
tR --- 色谱峰的保留时间 min；
Wh/2--- 色谱峰半高峰宽，min；
L--- 色谱柱长，mm
从上面公式看到色谱峰半高峰宽越小，色谱柱理论塔板数就越大，分离效果就越好。这似乎只关联到色谱柱性能，实际上也考验了液相色谱仪的动态响应速度。如果仪器的信号滤波过度、流通池及管道等死体积过大，就会产生谱图展宽效应。此时不管换上再好的色谱柱，色谱峰还是很宽，拖尾严重，峰形重叠。伍丰的LC-100智能液相色谱系统具有优良的动态响应速度，能检测峰宽在3秒钟以内的峰无畸变。

还有很多用户在买仪器前，拿着自己样品希望在自己将要选购仪器上试一下出个样品峰看看。只要是用液相色谱仪分析的，样品能够出峰是液相色谱仪所具备的最基本要求。至于所出的样品峰能不能马上满足客户的要求，客观地讲不一定是仪器的问题，还关联到分析方法。有些客户认为我有分析方法啊，怎么出的样品峰不能满足我的要求？因为分析方法里有很多细节问题，需要慢慢摸索和研究。一个小小的偏差导致的分析结果就会不同。但是，讲回来只要以上所说的技术指标优异，您在摸透分析方法后，分析结果一定会达到您的要求，因为这些指标起着决定性的作用。所以我们认为从以上的主要指标中可以反应出仪器的真实水平。


二．操作方便
操作方便性无论是对新手还是成熟的用户都是很重要的。操作越简单，越有利于提高分析效率，也为以后分析方法的拓展提供有力的帮助。而目前国内常用的色谱工作站仅仅起到一个后处理的功能，仪器各项功能的操作只能在仪器的键面上实行，使用较为繁琐，用户对各项功能的操作不能一目了然。上海伍丰科学仪器有限公司的WS-100工作站软件实现了真正的智能化操作。它摒弃了以往工作站软件只能起到数据处理的理念，率先在国内推出了集控制与后处理于一身的软件，液相色谱仪所有功能的操作在个人电脑上就可完成，在使用上给用户带来了极大的方便。另外采用了数字化信号交换系统，信号动态范围达到10的6次方，改变了目前液相色谱仪需经多重的模数转换带来的信号畸变和干扰。

三．系统的，整体开发
这里指的是仪器的整体开发，是一个完整的系统。目前市场上有这个现象，说我的泵是进口的，或者是检测器怎么好，用了什么很多的进口件组装等等。其实这是个误区。液相色谱是个复杂的系统，不是整体开发的，各项指标之间、软件和硬件、硬件和硬件等都不匹配，整体水平不会高到哪里去，而且在售后服务方面对用户也是不负责任的。
整体开发的主要优点有：各项技术指标统一、仪器各单元的通信协调、能够建立一个整体的数字化评价系统、体现了企业的科技及开发实力。
世界知名的液相色谱生产厂家的产品也都是整体开发的，所以能够保证仪器的整体水平。


四．稳定可靠，故障率低
其实这是仪器所具备的基本条件。但是目前国产液相色谱给用户的感觉就是稳定性差，故障率高。为什么？说起来很简单，就是加工工艺和生产管理。就目前国内的科技水平来讲，液相色谱仪并不存在较大的技术瓶颈。但是厂家往往忽视了些细节问题，在产品成形后问题被放大。所以，我公司摒弃了传统加工方法，而采用了世界先进的数控加工中心，加工水平和手段完全等同于国际先进的公司。在生产管理方面，引进TQM理念，每道生产工序都可以用数据来显现。采用世界先进的全数字化检测系统对其零部件和整机进行检测和检验，从而大大提高了生产效率和仪器整体质量。

希望以上所言对各位用户有所帮助，如有错漏之处，敬请指出。