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主题：【求助】做validation时为什么matrix effect总过不了

浏览0 回复23 电梯直达
karen
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发表于：2011/08/18 20:54:27 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大侠好，最近有一个问题一直折磨着我，就是在做药动validation 时为什么matrix effect总过不了，我是选了六个不同批次的血浆，每个批次做了三个，标线是用这六个批次的混合血浆做的，为什么标线都很好而单个批次的matrix effect过不了呢？都做了五六遍了，结果都是一样，急需各位帮忙分析一下？
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2011/8/18 21:12:29 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
说实话，我没真的用不同来源的血浆做过。是只有这六个批次的血浆吗，每次出问题的是不是同一批，先确定下是不是血浆的问题。最好把样品处理方法也说说。

另外，做基质效应也可以用针泵进样，按进样的色谱条件，液相进空白基质，分析基质效应的影响
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yuduoling
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2011/8/18 21:39:50 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有做过这个，学习一下了
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karen
liumin850104
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2011/8/18 21:48:10 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 pazuzu(pazuzu) 发表:
说实话，我没真的用不同来源的血浆做过。是只有这六个批次的血浆吗，每次出问题的是不是同一批，先确定下是不是血浆的问题。最好把样品处理方法也说说。

另外，做基质效应也可以用针泵进样，按进样的色谱条件，液相进空白基质，分析基质效应的影响


样品处理采用液液萃取 我也是同一来源分的六个批次，每次出问题的不是同一批，就连重复进样都不会是同一个批次出问题，总之就是得有不过的，而且差距还挺大的，不知道是不是血浆问题，做标线是用这六个批次的混合血浆，都没有任何问题，但matrix effect就不过，做空白血浆也很干净
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pazuzu
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2011/8/19 8:18:34 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
萃取过程中有没有发生乳化？震荡时间是不是足够长？很可能是样品处理的问题。
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胜邪
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2011/8/19 9:16:21 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我也觉得是样品制备问题，plasme蛋白沉淀也不错。
按pazuzu说的针泵进样方式考查基质效应吧，调调梯度，还是可以解决的。
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karen
liumin850104
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2011/8/19 9:18:21 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 pazuzu(pazuzu) 发表:
萃取过程中有没有发生乳化？震荡时间是不是足够长？很可能是样品处理的问题。


震荡10分钟，应该足够了，震完后由3000r离心5分钟，即使乳化了离心后也应该会破乳的，我第一次做时吹干后底部只有模糊的痕迹，明显很干，后来无论吹多长时间底部都会看到有东西的感觉，主要问题是标线很好，为什么matrix effect 就不行呢，折磨人啊
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karen
liumin850104
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2011/8/19 9:31:24 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 胜邪(nankingee) 发表:
我也觉得是样品制备问题，plasme蛋白沉淀也不错。
按pazuzu说的针泵进样方式考查基质效应吧，调调梯度，还是可以解决的。


我用的是等度，这个方法应该很成熟了，以前有好多人都做过也没出现类似问题，分析方法方面暂时应该还不能换
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peterhello
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2011/8/19 10:44:18 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 karen(liumin850104) 发表:
各位大侠好，最近有一个问题一直折磨着我，就是在做药动validation 时为什么matrix effect总过不了，我是选了六个不同批次的血浆，每个批次做了三个，标线是用这六个批次的混合血浆做的，为什么标线都很好而单个批次的matrix effect过不了呢？都做了五六遍了，结果都是一样，急需各位帮忙分析一下？

标线好不意味着就没有基质效应的问题阿，说不定前处理方法不是很合适，就是会有基质效应。
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pazuzu
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2011/8/19 11:09:07 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你指的这个过不了是什么情况，不平行，还是有基质效应但结果是平行的？
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karen
liumin850104
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2011/8/19 12:27:40 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 pazuzu(pazuzu) 发表:
你指的这个过不了是什么情况，不平行，还是有基质效应但结果是平行的？


%Dev 有的超过了20，结果没有规律性，不平行
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