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紫外可见分光光度计（UV）

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主题：【讨论】使用10mm以上的长光程比色皿可以提高检测的灵敏度吗？

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tutm

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发表于：2011/09/20 18:22:53 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

使用10mm以上的长光程比色皿可以提高检测的灵敏度吗？

我认为能提高吸光度的检测灵敏度，但不一定能降低分析方法的检测下限

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2011/9/20 19:37:04 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

感觉提高吸光度的检测灵敏度对于一般用户就够了，分析方法的检测下限都是计算出来的理论值，实际测样大多测不到检测线级别的样品。

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ldgfive

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2011/9/21 11:47:47 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

灵敏度可以提高，但是对检出限作用不大

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祥子

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2011/9/22 8:27:18 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tutm(tutm) 发表:
使用10mm以上的长光程比色皿可以提高检测的灵敏度吗？

我认为能提高吸光度的检测灵敏度，但不一定能降低分析方法的检测下限

应该是可以提高灵敏度，

因为理想下，A=K*b*C，b是光程，b大了，显然灵敏度大了。

检测限的话。

查到个资料，如下：

国际纯粹和应用化学联合会（IUPAC）对分析方法的检出限D.L作如下规定。

在与分析实际样品完全相同的条件下，做不加入被测组分的重复测定（即空白试验），测定次数尽可能多（试验次数至少为20次）。算出空白观测值的平均值X_b和标准偏差S_b。在一定置信概率下，被检出的最小测量值X_L以下式确定：

X _L= X_b+ K’S_b

式中：X_b —— 空白多次测得信号的平均值；

S_b—— 空白多次测得信息的标准偏差；

K’—— 根据一定置信水平确定的系数。

与X_L-X_b(即K’ S_b)相应的浓度或量即为检出限:

D.L = X _L- X_b/ K = k’S_b/ K

式中：k ——方法的灵敏度（即校准曲线的斜率）。

为了评估X_b和S_b_，实验次数必须至少20次。

1975年，IUPAC建议对光谱化学分析法取k’=3。由于低浓度水平的测量误差可能不遵从正态分布，且空白的测定次数有限，因而与k’=3相应的置信水平大约为90%。

此外，尚有将 K’取为4、4.6、5及6的建议。

其中有个k,校准曲线的斜率。如果增大光程可以增大这个斜率（也就是灵敏度）的话，那按这个公式，其他值保持不变的情况下，是可以降低检测限。

这个定义中空白的测试，S_{b应该就是反应仪器的噪声水平。与仪器检测限的三倍噪声定义有点像。}

这个资料的后部还提到：

4）在某些分光光度法中，以扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值为检出限。

如果按这个说法的话，那增大光程，0.01吸光度对应的浓度是降低的，所以检出限降低。

上面的提到的应该是方法检测限。仪器检测限还是有很明确的定义，噪声的三倍信号对应的浓度。这个也好理解，也合理。

不过，增大光程，可以降低噪声吗？噪声一般都是光电检测器和放大电路决定的，增大光程，光通过空白，透过率会降低一些，但降低很小，所以对后面的光电检测应该影响不大，噪声也不变小，仪器检测限也不会变小。

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2011/9/22 8:56:44 Last edit by nemoium