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液相色谱（LC）

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主题：【求助】有没有用人C18测氨基酸？

浏览0 回复15 电梯直达

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发表于：2011/10/19 14:37:22 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有没有人用C18柱测氨基酸？
我用的是安捷伦4.6*250mm，C18柱。
用乙酸钠和EDTA做流动相，OPA衍生，好几个峰分不开。
请问大家是用什么做流动相的呢？大

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2011/10/19 15:09:34 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

衍生下呢？

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xizhi

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2011/10/19 15:31:24 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

0.1%的TFA试试

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zhaohua8011

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2011/10/19 16:55:17 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有用衍生处理后，用C18色谱柱进行检测！

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jkjungle

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2011/10/20 14:35:39 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

对不起，无能为力，我们都用氨基酸分析仪的

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houjjun

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2011/10/25 10:20:04 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

得专用柱吧

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zhaohua8011

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2011/10/26 17:26:29 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我们公司买的 WATERS 方法包，按其操作！

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liufeilzu

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2011/10/26 20:17:59 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

一般来说甘氨酸出峰较早

5-10分钟有几个峰分不开，你可以设计凹形梯度

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doudou080508

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2011/10/27 14:04:33 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱前衍生，市场上有很多商品化的方法，
比如楼主用的Agilent的 OPA和FMOC衍生，
艾杰尔的DNPH衍生
Waters的ACCQ衍生
这些方法都用过，各有优势，都能分开。
一般刚开始的时候都会分的不是很好，在每个每个分不开的地方，将梯度变化设定缓一些，都能搞定。
不同的HPLC仪器，其延迟体积不同是最大的影响，所哟，不同型号的仪器，需要设定不同的梯度来洗脱。

可能，需要楼主耐心的调整梯度了~~

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