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液相色谱（LC）

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主题：新人提问:关于洗拄的问题

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kentuckey

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发表于：2006/03/14 19:33:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1 我们单位有根scx 离子交换柱请问洗柱的时候是不是只要用100%的纯水冲即可?(它是不是很怕有机物质的)?

2 一般的C18的柱子洗的时候是用95%甲醇+10%水冲洗好? 还是直接用10%的异丙醇冲洗?

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2006/3/14 23:05:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

C18的清洗主要还是根据分析样品的流动相的比例，甲醇比例由低到高，最后100％甲醇冲洗。

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jesseyu

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2006/3/14 23:10:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

楼上正解,c18柱的清洗要几个过程的,不是只用哪个流动相就可以的,特别是样品比较杂的时候

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maplecao

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2006/3/15 9:01:00 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。
下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序，作为参考：硅胶柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格脱水。甲醇能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次冲洗，再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略最后用水冲洗这一步。一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质，在甲醇（乙腈）冲洗时重复注射100~200µl四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲亚砜数次。此外，用乙腈、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脱能除去蛋白质污染。
希望对你有帮助！

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